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雷公藤内酯醇抑制人口腔表皮样癌细胞增殖的实验研究

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第一章材料与方法

1.材料

1.1主要仪器和试剂

1.2主要试剂的配制

2.方法

2.1 细胞株及细胞培养

2.2 MTT法检测TP对细胞的增值抑制作用

2.3瑞氏染色观察细胞凋亡

2.4流式细胞术测定细胞周期

2.5 Annexin V-FITC双标法检测细胞凋亡

3.统计学方法

第二章结果

1.MTT法检测TP对KB细胞增殖活性及生长抑制率的影响

2.油镜下观察KB细胞形态变化

3.TP使KB细胞周期阻滞于G0/G1期

4.Annexin V-FITC法检测细胞凋亡率

第三章讨论

第四章结论

参考文献

综述:雷公藤内酯醇的药理作用及其抗肿瘤作用研究进展

攻读学位期间主要的研究成果

致谢

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摘要

目的:雷公藤内酯醇(Triptolide,TP)是从我国的传统中药雷公藤中提取主要有效成分之一,具有抗炎、免疫抑制、对多种肿瘤有抑制作用,但对口腔癌的作用研究报道较少,本研究初步探讨雷公藤内酯醇对人口腔表皮样癌细胞KB的体外抗肿瘤作用及其机制,为雷公藤内酯醇治疗口腔癌提供一定的理论依据。
   方法:1.采用噻唑蓝(MTT)比色法,检测不同浓度(5、10、15、20、25ng/ml)的雷公藤内酯醇作用24、48、72h后对人口腔表皮样癌细胞(KB)增殖活性的影响。
   2.瑞氏染色(Wright staining),油镜下观察细胞形态改变。
   3.流式细胞仪测定细胞周期。
   4.流式细胞Annexin V-FITC双标检测细胞凋亡。
   结果:1.雷公藤内酯醇对KB细胞的增殖抑制呈明显的剂量与时间依赖性。
   2.瑞氏染色能明显观察到细胞凋亡特征。
   3.细胞周期阻滞于G0/G1期。
   4.Annexin V-FITC双染进一步证实可引起细胞凋亡。
   结论:1.雷公藤内酯醇能显著抑制体外培养的KB细胞增殖。
   2.雷公藤内酯醇能阻滞KB细胞于G0/G1期。
   3.雷公藤内酯醇可诱导KB细胞凋亡。

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