分化型甲状腺癌突变BRAF基因突变、TERT与PPARγ、NIS、TSHR表达启动子的相关性

摘要

目的：探讨分化型甲状腺癌（DTC）鼠类肉瘤滤过性毒菌致癌同源体B1（BRAF）基因突变、端粒酶逆转录酶（TERT）启动子突变和过氧化物酶增殖物激活受体γ（PPARγ）、钠碘转运体（NIS）及促甲状腺激素受体（TSHR）表达及临床意义，并研究BRAF基因突变、TERT启动子突变对PPARγ、NIS及TSHR表达的影响及相关性。
　　方法：收集病理确诊的DTC患者229例，并取同期手术治疗的结节性甲状腺肿52例及正常甲状腺组织31例。提取DNA采用PCR扩增产物直接测序法检测BRAF基因V600E点突变、TERT启动子C228T及C250T点突变，免疫组织化学SP法检测PPARγ、NIS及TSHR蛋白表达。采用SPSS22.0统计软件Pearson chi-square（χ2）分析和非参数Spearman相关分析，P<0.05为差异有统计学意义。
　　结果：1.结节性甲状腺肿及正常甲状腺组织中均未发现BRAF V600E基因突变和TERT启动子C228T及C250T点突变。2.DTC患者BRAF V600E基因突变率为62.0％，与性别、年龄、肿瘤大小、淋巴结转移及复发危险度分层均无关（P>0.05）。3.DTC患者TERT启动子突变率为7.9%，其中C250T位点突变率为7.0%,C228T位点为0.9%，与性别、年龄及复发危险度分层相关（P<0.05）。4.DTC患者TERT启动子突变同时伴BRAF V600E基因突变率为61.1%，与淋巴结转移及复发危险度分层相关（P<0.05）。5.DTC患者BRAF V600E突变组PPARγ阳性率为59.9%，高于BRAF V600E野生组26.4%（P<0.05）；DTC患者PPARγ阳性率在只存在BRAF V600E突变组（BRAF+、TERT-）和BRAF V600E、TERT启动子同时突变组（BRAF+、TERT+）分别为59.5%和63.6%，均高于BRAF V600E、TERT启动子均未突变组（BRAF-、TERT-）25.0%（P<0.05）。6.NIS在DTC中阳性率为55.5%，低于结节性甲状腺肿78.9%及正常甲状腺组织77.4%（P<0.05）；DTC患者BRAF+、TERT+组NIS阳性率18.2%，低于BRAF-、TERT-组51.3%（P<0.05）；DTC患者NIS细胞浆表达者48.2%发生于BRAF V600E突变组高于BRAF V600E野生组29.5%；细胞膜表达者70.5%发生于BRAF V600E野生组高于BRAF V600E突变组51.8%（P<0.05）。7.TSHR在DTC中阳性率为41.0%，与肿瘤大小有关（P<0.05）；DTC患者BRAF V600E突变组TSHR阳性率48.6%高于BRAF V600E野生组28.7%（P<0.05）；DTC患者TSHR阳性率在BRAF+、TERT-组，BRAF-、TERT+组及BRAF+、TERT+组分别为46.6%、85.7%、72.7%，均高于BRAF-、TERT-组23.8%（P<0.05）。
　　结论：1.检测BRAF V600E基因突变和TERT启动子C228T及C250T点突变有助于鉴别甲状腺肿瘤良、恶性。2.DTC患者BRAF V600E基因突变率较高，但单独检测BRAF V600E突变尚难对DTC预后评估有指导。TERT启动子在DTC中突变率较低，且以C250T位点突变更多见。联合检测BRAF V600E和TERT启动子突变对DTC预后评估具有指导意义。3.DTC患者PPARγ表达受BRAF V600E和TERT启动子突变共同影响，提示BRAF V600E和TERT启动子突变可能与PPARγ共同作用促进肿瘤组织增生，支持PPARγ作为促癌因子的观点。4.DTC患者NIS表达定位与BRAF V600E有关，NIS表达降低与BRAF V600E和TERT启动子同时突变有关，检测BRAF V600E和TERT启动子同时突变可间接预测DTC组织的摄碘能力。5.DTC患者TSHR表达受BRAF V600E和TERT启动子突变共同影响。

目录

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缩略词表

第一章 文献综述

1.RAS

2. PPAR

3. BRAF

4. TERT

5. NIS

6. TSHR

7. RET/PTC

8. PTTG

9. Her-2

10. CTNNB1

11. IG20

12.其它

前言

第二章 材料和方法

2.1 研究对象

2.2 主要试剂和仪器

2.3 研究方法

第三章 结 果

3.1 BRAF V600E、TERT启动子突变及相关性分析

3.2 PPARγ、NIS及TSHR蛋白表达及相关性分析

3.3 BRAF V600E与TERT启动子突变对PPARγ、NIS及TSHR表达的影响

第四章 讨 论

4.1 DTC患者BRAF V600E、TERT启动子突变及相关性

4.2 BRAF V600E、TERT启动子突变对DTC患者PPARγ表达的影响及相关性

4.3 BRAF V600E、TERT启动子突变对DTC患者NIS表达的影响及相关性

4.4 BRAF V600E、TERT启动子突变对DTC患者TSHR表达的影响及相关性

第五章 结论与展望

5.1主要结论

5.2研究展望

参考文献

在学期间研究成果

致谢