短期雌激素替代治疗对中老年卵巢切除大鼠行为学及大脑白质作用的研究

摘要

体视学方法研究已经发现人大脑的萎缩主要是由于大脑白质内有髓神经纤维丢失所致，并且以细小直径的有髓神经纤维丢失为主。大量研究发现中老年女性在雌激素替代治疗(estrogen replacement therapy，ERT)后出现了行为学的改善以及大脑结构的改变，如影像学研究显示中老年女性接受ERT后出现白质体积增加。ERT如果能够延缓大脑的衰老进程，是否是通过保护中老年大脑白质及白质内有髓神经纤维来起作用的，国内外尚未见报道。中老年卵巢切除(ovariectomized，OVX)大鼠可模拟女性绝经后低雌激素水平的生理状态。在给予中老年OVX大鼠为期一个月的ERT后，我们运用Morris水迷宫实验来比较雌激素替代治疗组和安慰剂治疗组大鼠的行为学差异，并且运用体视学方法结合透射电镜技术来准确定量研究雌激素替代治疗组大鼠大脑白质及白质内有髓神经纤维的改变，建立形态学改变与行为学改变的关系。本研究运用的方法还可为将来运用该模型研究ERT对正常老年大脑白质及神经退行性疾病状态下大脑白质的作用提供可靠、有效的研究手段。
　　第一部分
　　1.材料与方法
　　1.1雌性SD大鼠（10-12月龄）19只，行双侧卵巢切除术。术后1个月，随机分为雌激素替代治疗(OVX+E)组和安慰剂治疗(OVX+Veh)组。OVX+E组（10只）大鼠给予持续1个月的17β-estradiol颈背部皮下注射，OVX+Veh组（9只）大鼠给予持续1个月的芝麻油颈背部皮下注射。分别在术后及ERT后进行血清雌激素水平的检测。尸检时检查并测量子宫重以再次确保卵巢切除完整性及雌激素替代治疗的有效性。
　　1.2在进行ERT4周后，对OVX+ Veh组大鼠和OVX+E组大鼠进行Morris水迷宫实验。
　　2.结果
　　2.1 ERT后OVX+E组大鼠血清雌激素水平显著高于卵巢切除术后大鼠的血清雌激素水平和安慰剂治疗后OVX+Veh组大鼠的血清雌激素水平(P＜0.05)。且卵巢切除术后大鼠的血清雌激素水平和安慰剂治疗后OVX+Veh组大鼠的血清雌激素水平之间没有显著性差异。
　　2.2 OVX+Veh组大鼠的平均子宫重量显著低于OVX+E组大鼠的子宫重量(P＜0.05)。
　　2.2 Morris水迷宫实验中，OVX+E组大鼠在前5天的隐藏平台实验中的潜伏期明显短于OVX+Veh组大鼠(P＜0.05);在第6天的可见平台实验中，两组的潜伏期差异不具有统计学意义。
　　第二部分
　　1.材料与方法
　　1.1行为学测试结束后，每组随机选取5只大鼠。随机选取一侧大脑半球作1mm连续切片，在解剖显微镜下放大10倍拍照。运用卡瓦列里原理计算大脑白质的体积。
　　1.2在每只大鼠的连续脑片中随机抽取5块大脑白质块，做成60 nm的超薄切片，然后每张切片在透射电镜下随机选取8个视野放大6000倍拍照。
　　1.3 OVX+Veh组和OVX+E组大鼠大脑白质内有髓神经纤维的长度密度和总长度、体积密度和总体积、髓鞘的体积密度和总体积及有髓神经纤维的平均直径均用体视学方法分别计算。
　　2.结果
　　2.1 OVX+E组大鼠大脑白质体积与OVX+Veh组大鼠之间的差异不具有统计学意义(P＞0.05)。
　　2.2 OVX+E组大鼠大脑白质内有髓神经纤维总长度和总体积与OVX+Veh组之间的差异不具有统计学意义(P＞0.05)。
　　2.3 OVX+E组大鼠白质内有髓神经纤维髓鞘的总体积与OVX+Veh组之间的差异不具有统计学意义(P＞0.05)。
　　2.4 OVX+E组和OVX+ Veh组大鼠大脑白质内有髓神经纤维的平均直径间的差异不具有统计学意义(P＞0.05)。
　　2.5与OVX+Veh组大鼠比较，OVX+E组大鼠大脑白质内在直径为0-1.8μm范围内的有髓神经纤维总长度没有显著性差异(P＞0.05)。
　　全文结论
　　1本文再次证实了ERT可以改善中老年卵巢切除大鼠的空间记忆能力。
　　2本研究将透射电镜和体视学手段相结合，准确定量研究了中老年大鼠在卵巢切除后进行1个月ERT后大脑白质内有髓神经纤维的改变，获得了OVX+Veh组和OVX+E组大鼠大脑白质总体积及大脑白质内有髓神经纤维总长度、总体积、平均直径及髓鞘总体积等基本数值，为今后的同类研究提供了重要的参考数据。
　　3 OVX+E组大鼠大脑白质总体积、白质内有髓神经纤维的总长度、总体积、平均直径及髓鞘总体积与OVX+ Veh组大鼠之间的差异均不具有统计学意义。

目录

声明

摘要

前言

第一部分 中老年卵巢切除大鼠造模及短期雌激素替代治疗对中老年卵巢切除大鼠行为学的作用

1．材料与方法

2．结果

3．讨论

第二部分 短期雌激素替代治疗对中老年卵巢切除大鼠大脑白质及白质内有髓神经纤维的体视学研究

1．材料与方法

2．体视学结果

3．讨论

全文结论

参考文献

文献综述 雌激素对大脑白质结构作用的研究进展

致谢

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