声明
第1章 文献综述
1.1细胞壁
1.2木质素
1.2.1木质素的组成
1.2.2木质素单体的生物合成过程
1.2.3木质素的聚合过程
1.2.4木质素单体的转运
1.2.5木质素的应用
1.3 ABC转运蛋白
1.3.1 ABC转运蛋白的结构
1.3.2植物ABC转运蛋白的分类
1.3.3植物ABC转运蛋白的功能
1.3.3 ABC转运蛋白的木质素单体转运功能
第2章 引言
2.1研究目的及意义
2.2研究内容
2.2.1木质素单体响应基因的筛选
2.2.2 AtABCG36基因的克隆及载体构建
2.2.3 AtABCG36基因的组织特异性与亚细胞定位分析
2.2.4 AtABCG36蛋白转运底物鉴定
2.2.5拟南芥abcg36功能缺失突变体的表型分析
2.2.6杨树ABCG36同源基因的功能分析
2.3研究目标
2.4技术路线
第3章 实验材料与方法
3.1实验材料
3.1.1实验所用植物材料
3.1.2菌种和质粒
3.2实验试剂
3.2.1试剂及试剂盒
3.2.2常用激素和抗生素的配制
3.2.3植物培养基和细菌培养基
3.2.4其它常用试剂
3.3仪器设备
3.4实验方法
3.4.1拟南芥T-DNA插入突变体的鉴定
3.4.2木质素单体胁迫处理
3.4.3 DNA提取
3.4.4总RNA提取
3.4.5反转录
3.4.6目的基因的扩增
3.4.7植物表达载体与酵母表达载体构建
3.4.8农杆菌感受态的制备和转化
3.4.9拟南芥的遗传转化
3.4.10烟草瞬时转化
3.4.11荧光定量PCR
3.4.12石蜡包埋与切片
3.4.13间苯三酚染色及木质素自发荧光检测
3.4.14原位杂交
3.4.15木质素总量与单体含量检测
3.4.16酵母感受态细胞的制备和转化
3.4.17酵母生长曲线测定
3.4.18酵母转运效率检测
3.4.19杨树同源基因分析
第4章 实验结果与分析
4.1木质素单体响应基因的筛选
4.2拟南芥abcg36 T-DNA插入突变体鉴定
4.3拟南芥abcg36功能缺失突变体抵抗木质素单体胁迫能力的变化
4.4拟南芥AtABCG36基因的组织特异性分析
4.5拟南芥AtABCG36转运蛋白的亚细胞定位
4.6拟南芥abcg36功能缺失突变体茎的形态解剖学观察
4.7拟南芥abcg36功能缺失突变体细胞壁组分测定
4.8拟南芥AtABCG36对木质素合成途径功能基因表达的影响
4.9 AtABCG36对酵母突变体生长的影响
4.10 AtABCG36转运木质素单体能力的检测
4.11 AtABCG36与杨树PtrABCG36转运蛋白的进化分析
4.12 PtrABCG36转运蛋白的功能分析
4.12.1 PtrABCG36的组织定位与亚细胞定位
4.12.2过量表达PtrABCG36对拟南芥抵抗木质素单体胁迫的影响
4.12.3过量表达PtrABCG36对拟南芥木质素生物合成的影响
4.12.4 PtrABCG36转运木质素单体能力的检测
第5章 讨论
参考文献
附录
致谢
发表论文及参加课题一览表
