创伤反应差异性的肺血管结构基础及与Cxcl15基因的关系

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该研究以该研究室前期的研究结果为基础,用业已证明的对创伤反应有明显差异的BALB/C和C57BL/6两近交系小鼠为研究对象,以肺血管机制在创伤反应差异性中的作用为研究主线,首先对创伤反应差异性现象进行验证,然后对创伤反应差异性的肺血管生理结构基础进行探讨,并有目的的从创伤后肺表达差异的众多基因中选择相关基因做进一步的深入研究,在验证这些基因的确参与了创伤反应差异性的基础上,再从基因结构和表达两个方面探讨造成创伤反应差异性的可能原因以及这些基因在创伤中的意义.主要的结果与结论:1.BALB/C和C57BL/6小鼠在相同的全身性冲击波暴露致伤条件下,创伤后早期(72小时以内)死亡率和肺损伤严重度有明显差异,其中C57BL/6小鼠对冲击波致伤表现为相对耐受.2.BALB/C和C57BL/6小鼠的死亡率主要发生在伤后1h内,但在同系动物内雌雄之间的死亡率和肺损伤程度并无明显差异.3.用荧光示踪法对创伤反应有明显差异的BALB/C和C57BL/6小鼠的肺血管通透性进行了比较.4.采用荧光定量PCR方法对两系小鼠Cxcl15基因生理状态的表达进行了比较.结果表明:Cxcl15基因在C57BL/6小鼠中的表达量较在BALB/C小鼠中的表达量低,且有显著性差异(P=0.005).5.采用Northern的实验方法对两系小鼠创伤后Cxcl15基因的表达进行比较.6.采用常规PCR,设计引物,在基因组上对两系小鼠的4个外显子、上下游各500bp左右的区域分别进入扩增.将两系小鼠基因组是的结构进行比较,以发现差异,从结构上寻找Cxcl15基因在两系小鼠创伤前后表达差异的可能原因.基因结构解析结果:与C57BL/6小鼠相比,BALB/C小鼠的第三外显子中存在一处碱基突变,多了一碱基(腺嘌呤)的插入.生物信息学预测结果提示这两系小鼠Cxcl15基因的功能有所差异.7.采用Northern的实验方法,将小鼠Cxcl15基因与小鼠8种主要组织来源的PolyA<'+>RNA印迹膜进行杂交.实验结果提示Cxcl15基因在小鼠肺中有着表达的组织特异性,而且该实验结果还提示可能存在Cxcl15基因的不同亚型,其分子量分别为 1Kb和2.4Kb左右.8.采用原位杂交的方法,对Cxcl15基因在小鼠肺组织中的分布特性进行了研究,结果:Cxcl15基因在小鼠肺支气管上皮细胞胞浆(不排除胞核)中明显表达.

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作者
黄文;
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作者单位

第三军医大学;

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授予单位第三军医大学;
学科外科学(野战外)
授予学位博士
导师姓名朱佩芳,王正国;
年度 2004
页码
总页数
原文格式 PDF
正文语种中文
中图分类胸部;
关键词
冲击波; 冲击伤; BALB/C; C57BL/6; 小鼠; 肺; 损伤; 易感性; 血管结构; Cxcl15基因; 创伤反应差异性; 肺血管通透性; 基因表达; 基因结构; 基因分布; 荧光示踪法; 荧光定量PCR; 聚合酶链式反应; Northern; 原位杂交;

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