安逸生活方式与艰苦生活方式下SD大鼠糖脂代谢的比较研究

摘要

背景：我国肥胖、糖尿病、心脑血管疾病、脂肪肝等糖脂代谢紊乱病患病率迅速上升，已成为主要的卫生难题。生活方式在糖脂代谢病发生发展中发挥重要作用。流行病学、权威指南等研究证据表明，安逸生活方式（Sedentary lifestyle）与糖脂代谢病发生联系紧密，但是在基础研究少有报道。
　　目的：本研究在动物水平开展，比较安逸生活方式和艰苦生活方式对SD大鼠糖脂代谢的影响，为糖脂代谢病基础研究提供证据。
　　方法：⑴动物于普通级环境下维持饲料观察一周，光照条件为13hL/11hD，自由进食，饮水。按体重无差异随机分成4组：空白对照，安逸生活方式组，艰苦生活方式干预A组，艰苦生活方式干预B组。⑵正常组为正常光照13hL/11hD，自由饮食4周；安逸生活方式组为正常光照13hL/11hD，自由高糖高脂饮食12周；艰苦生活方式干预A组光照条件为持续24hL，并置于小平台水环境4周，后高脂饮食8周；艰苦生活方式干预 B组正常光照13hL/11hD，高脂饮食4周，然后进行生活干预，光照条件为持续24hL，并置于水环境小平台4周，最后继续高脂饮食4周。⑶大鼠每天8：00测量体重，每周换垫料2次；第4、8、12周进行OGTT实验，经过12周后，大鼠在处死前禁食8小时，并在不同时间点处死，测定大鼠TC、TG、HDL-C、LDL-C、FBG、FINS、HOMA-IR、TNF-α、IL-6、总脂联素、HMW脂联素。取大鼠肝脏、皮下脂肪、附睾脂肪、褐色脂肪，制作脂肪组织病理组织切片，Western blot法检测脂肪组织中 PPARγ蛋白和 C/EBPβ蛋白表达量，免疫组化染色技术检测PPARγ、C/EBPβ在脂肪组织中的表达，RT-PCR法检测脂肪组织PPARγ和C/EBPβ基因表达。
　　结果：①12周以后，各组大鼠的体重均有增高，安逸生活方式组的肝指数对比正常组显著增加，而艰苦生活方式干预的两组对比安逸生活方式组，肝指数均降低。正常组 SD大鼠与安逸生活方式组在4周内体重增加明显，体型胖硕，安逸生活方式组大鼠毛发油亮，腹部脂肪沉积，性情温顺，不喜动，行动缓慢。艰苦生活方式组SD大鼠毛发脱落明显，稍抓捏皮肤则毛发随即掉落。而且，艰苦期内动物易激怒。②脂代谢：与正常饮食组相比，安逸生活方式组血清TG水平升高，TC、HDL-C、LDL-C水平无显著性差异，表现为高甘油三酯血脂特点；生活干预A组及生活干预B组与安逸生活方式组对比，并未显著性改善血脂TG（P＞0.05）；生活干预A组HDL-C均值降低，但未有统计学差异（P＞0.05），生活干预B组HDL-C水平显著降低（P＜0.05）；生活干预A组及生活干预B组LDL-C水平显著降低（P＜0.05），生活干预A组和生活干预B组间无显著性差异（P＞0.05）。③糖代谢：与正常组相比，安逸生活方式组的FBG、FINS、HOMA-IR显著性升高（P＜0.05），生活干预组大鼠 FBG、FINS、HOMA-IR水平明显较安逸生活方式组降低（P＜0.05）； OGTT、HOMA-IR结果显示安逸生活方式组较正常组升高，生活干预组较安逸生活方式组显著下降（P＜0.05）。对比正常组，安逸生活方式组血清TNF-α的水平呈显著性升高（P＜0.05），生活干预组对比安逸生活方式组显著性下降（P＜0.01）。④组织病理切片染色：正常组皮下脂肪和附睾脂肪组织病理切片与安逸生活方式组脂肪组织病理切片呈数量少，体积较大，生活干预组并未显著改善白色脂肪组织的形态。与正常组对比，安逸生活方式组褐色脂肪细胞呈体积增大，脂肪组织出现白色化，生活干预两组对比安逸生活方式组，细胞体积显著变小，数量增加的情况。⑤Western blot结果显示，与正常组对比，安逸生活方式组大鼠脂肪组织的PPARγ、C/EBPβ蛋白及基因表达下调，生活干预A组PPARγ、C/EBPβ蛋白表达较安逸生活方式组显著上调，生活干预B组PPARγ、C/EBPβ蛋白表达较安逸生活方式组上调。免疫组化结果显示，与安逸生活方式组对比，生活干预组的皮下脂肪中 PPARγ的表达无显著性差异，C/EBPβ两组均显著性升高；生活干预A组附睾脂肪中PPARγ显著性升高，生活干预B组无显著性差异，生活干预两组C/EBPβ均无显著性差异；生活干预A组褐色脂肪中PPARγ显著性升高，生活干预B组无显著性差异，生活干预两组中 C/EBPβ均显著性升高。RT-PCR结果显示，生活干预 A组的PPARγ、C/EBPβ的mRNA水平显著上调，生活干预B组无显著性差异。
　　结论：安逸生活方式与艰苦生活方式对大鼠糖脂代谢的影响作用不同；艰苦生活方式能有效上调脂肪组织中的PPARγ、C/EBPβ表达，改善脂肪分化，增加脂肪细胞因子的分泌，改善安逸生活方式下大鼠的糖脂代谢紊乱。

目录

声明

第一章 绪言

1.1糖脂代谢紊乱

1.2不同生活方式与糖脂代谢

1.3中医看待生活方式

1.4糖脂代谢相关关键因子

1.5安逸与艰苦生活方式比较研究课题的提出

1.6立题意义与目的

1.7技术路线图

第二章 不同生活方式对高脂饮食SD大鼠的糖脂代谢影响

2.1实验材料

2.2实验方法

2.3结果

2.4本章小结

第三章 艰苦生活方式干预对高脂饮食SD大鼠脂肪组织的作用以及PPARγ、C/EBPβ蛋白的表达影响

3.1实验材料

3.2三类脂肪重量

3.3脂肪组织HE染色

3.4脂肪因子测定

3.5组织总蛋白提取

3.6 Western blot

3.7数据分析

3.8结果

3.9本章小结

第四章 艰苦生活方式干预对高脂饮食SD大鼠PPARγ、C/EBPβ的免疫组化及mRNA表达

4.1实验材料

4.2实验方法

4.3结果

4.4本章小结

第五章 总结与展望

参考文献

攻读硕士期间发表论文

中英文缩略表

致谢