环境因子和弧菌对白斑综合症病毒(WSSV)在凡纳滨对虾体内增殖的影响

摘要

白斑综合症病毒(White spot syndrome virus,WSSV)是一种宿主广泛,传染性强,对虾高致死性病毒,严重制约世界对虾养殖业发展。WSSV在对虾体内增殖不仅与虾体的免疫水平,病毒自身有关,还与环境因子密切相关。环境因子不仅影响对虾的免疫水平,还能影响WSSV的致病力。研究环境因子对WSSV致病力及在宿主体内增殖的影响成为解决 WSSV问题的重要手段。本文通过盐度、氨氮、亚硝酸氮渐变和突变对WSSV感染凡纳滨对虾及WSSV在对虾体内增殖的影响,并探讨不同温度条件下3种弧菌分别对白斑综合症病毒在对虾体内增殖的影响。结果如下:
　　1、盐度由起始盐度(23±1)往高盐度(32±1)和低盐度(14±1)突变在整个实验中对凡纳滨对虾的累积死亡率和对虾体内病毒增殖的影响显著(P<0.05),盐度渐变实验各组至24h对虾死亡率低于18.9％,48h出现死亡高峰,72h~96h存在显著差异(P<0.05)。因此盐度变化会影响对虾的抗病能力,可造成对虾体内WSSV快速增殖;对携带WSSV对虾,盐度变化会大大提高WSSV从潜伏感染转为急性感染的可能,盐度是引起WSSV从潜伏感染转为急性感染的关键影响因子之一。
　　2、氨氮浓度从起始浓度0.05 mg/L往中浓度1.25 mg/L和高浓度3.0 mg/L突变在整个实验中对凡纳滨对虾的累积死亡率和对虾体内病毒增殖影响显著(P<0.05),氨氮浓度渐变实验各组至24h累积死亡率低于13.3%(P>0.05),48h后开始出现差异(P<0.05)。因此氨氮浓度变化越大对对虾体内病毒增殖影响越显著,WSSV从潜伏感染转为急性感染的可能越大,所以控制水质中氨氮含量在低浓度水平对预防WSS爆发至关重要。
　　3、整个亚硝酸氮浓度变化实验,先感染WSSV实验中,亚硝酸氮由起始浓度0.05 mg/L往中浓度10 mg/L和高浓度20 mg/L渐变和突变过程中对凡纳滨对虾累积死亡率及病毒增殖影响显著(P<0.05)。后感染WSSV实验中,亚硝酸氮由起始浓度0.05 mg/L往中浓度10 mg/L和高浓度20 mg/L渐变、突变至24h对虾死亡率低于12.2%,48h后突变组首先出现死亡高峰,72h~120h存在显著差异(P<0.05),因此携带WSSV的对虾对亚硝酸氮浓度变化更敏感,引起WSSV从潜伏感染转为急性感染。亚硝酸氮突变结果和渐变相比,亚硝酸氮突变更容易提高对虾对WSSV的易感性。
　　4、不同温度下副溶血弧菌和WSSV的致病性:温度为19±1℃条件下,至实验结束各组累积死亡率和病毒携带量分别低于11.1%,1.2×103 copies/g。温度25±1℃条件下,48h~96h单独感染WSSV组死亡率(最大值63.3%)与合并感染组(62.2%)无明显差异,但12 h~72 h所有合并感染组病毒携带量(最大值2.5×102 copies/g)明显低于单独感染WSSV组(1.9×105 copies/g)。96h合并感染组病毒增殖迅速(5.7×104 copies/g)。细菌单独感染组死亡率随浓度升高而升高(21.1%)。温度为31±1℃条件下,单独感染WSSV组死亡率和病毒携带量(47.8%,2.2×104 copies/g)明显低于合并感染组(77.8%,3.9×105 copies/g)。合并感染组和单独感染细菌组(33.3%)致死率随细菌浓度升高而升高。说明合并感染(副溶血弧菌和WSSV)和单独感染副溶血弧菌对对虾的致病力随温度升高而升高,而且合并感染在不同温度下对WSSV增殖影响显著。
　　5、不同温度下鳗弧菌和WSSV的致病性:温度为19±1℃条件下,至实验结束各组累积死亡率和病毒携带量分别低于11.1%,1.2×103 copies/g。当温度为25±1℃时,48 h~96 h单独感染 WSSV累积死亡率与合并感染组差异显著(P<0.05),而且合并感染组不同浓度之间存显著差异(P<0.05),死亡率最大值为77.8%(合并感染浓度2.3×106 cfu/ml组)。当温度为31±1℃时,各组累积死亡率在48 h开始升高,合并感染组死亡率和病毒增殖明显快于单独感染WSSV组。随着感染时间延长,单独感染鳗弧菌组随浓度升高,对虾死亡加快。因此低温条件下,鳗弧菌和WSSV致病力不高,随着温度升高,合并感染的致病力随温度升高而升高,即温度能显著影响鳗弧菌和WSSV的致病力。
　　6、不同温度下哈维氏弧菌和WSSV的致病性:温度为19±1℃条件下,整个实验过程死亡率都低于8.9%,各组病毒携带量低于3.9×104 copies/g。温度25±1℃条件下,病毒单独感染组(71.1%,1.9×105 copies/g)和高浓度继发感染组(77.8%,3.2×106 copies/g)死亡率及病毒携带量从实验中期开始明显高于其他组(P<0.05),死亡加快,病毒携带量迅速增加。单独感染哈维氏弧菌组随感染浓度升高为增加,最大值为(21.1%)。温度31±1℃条件下,单独感染WSSV组(47.8%,2.2×104 copies/g)从实验中期开始明显低于继发感染组(80.0%,6.1×106 copies/g);单独感染哈维氏弧菌组随浓度升高而升高(24.4%)。说明温度对WSSV和哈维氏弧菌致病力影响显著,温度升高使继发感染和单独感染细菌的致病力升高,高温和低温对WSSV致病力有抑制作用。

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1 前言

1.1 国内外研究进展

1.2 研究目的和意义

2 盐度变化对感染白斑综合症病毒的凡纳滨对虾的影响

2.1 实验材料与方法

2.2 实验结果

2.3 讨论

3 氨氮浓度变化对感染白斑综合症病毒的凡纳滨对虾的影响

3.1 材料与方法

3.2 实验结果

3.3 讨论

4 亚硝酸氮浓度变化对感染白斑综合症病毒的凡纳滨对虾的影

4.1 材料与方法

4.2 实验结果

4.3 讨论

5 不同温度下副溶血弧菌和白斑综合症病毒对凡纳滨对虾的致

5.1 材料与方法

5.2 实验结果

5.3 讨论

6 不同温度条件下鳗弧菌和白斑综合症病毒对凡纳滨对虾的致

6.1 材料与方法

6.2 实验结果

6.3 讨论

7 不同温度下哈维氏弧菌和白斑综合症病毒对凡纳滨对虾的致

7.1 材料与方法

7.2 实验结果

7.3 讨论

8 主要结论

8.1 3种环境因子对凡纳滨对虾体内WSSV增殖的影响

8.2 不同温度条件下3种弧菌和WSSV对凡纳滨对虾的致病性

参考文献

致谢

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