利用RAPD技术对吉林省重要果树资源的鉴定研究

摘要

利用RAPD技术对小苹果、越橘、穗醋栗、李、杏、樱、猕猴桃、抗寒葡萄、梨等68份吉林省果树种质在资源分类、亲缘关系及种质鉴别等方面进行了研究。 1、用10个引物对吉林省8份小苹果种质进行RAPD扩增，结果表明：用S337，S443，S446这3个引物可完全鉴别这8份小苹果种质资源。K9、大秋和龙冠聚为一类，新苹1号与金红聚为一类，黄太平、吉早红、和山定子各自聚为一类。金红与吉早红二个品种不仅在RAPD条带上表现了很大的差异，而且遗传距离为0.295455，证明吉早红与金红之间亲缘关系较远。 2、用7个引物对吉林省7份越橘种质进行RAPD扩增，结果表明：越橘的RAPD扩增有较强的多态性，共扩增出42条带，多态性在33.3％～100％之间。用2个引物就可以很好地区别和鉴定供试的7个越橘品种。 3、用12个引物对吉林省10份黑穗醋栗种质进行RAPD扩增，结果表明：黑穗醋栗RAPD条带在600bp～3200bp之间，DNA多态性较强，共扩增出58条带，多态性在50％～100％之间。用S84与S89可鉴定所有品种；用S84与S155也可鉴定10个品种。 4、用12个引物对以吉林省11份李、杏、樱种质进行RAPD扩增，结果表明：共扩增出李、杏、樱80条带，多态性在66.7％～100％之间。由各引物扩增结果来看，李、杏、樱的扩增条带有明显差异，产生条带的多寡及区域不尽相同，有的多态性条带为杏、樱独有，而李少有或没有。 5、选用10个随机引物对11份猕猴桃种质进行RAPD扩增，结果表明：每个引物扩增带在4～10个之间，DNA长度大小从400bp～3000bp。共扩增64条带，DNA多态性强，在60％～100％，平均为79.9％。S6-2700，S19-1450为软枣猕猴桃特有带，S3-2000，S21-2000为狗枣猕猴桃特有带，S21-S3-800，S45-700，S43-1200为葛枣猕猴桃特有带。 6、用9个随机引物对10份抗寒葡萄品种(品系)进行RAPD扩增，结果表明：山葡萄种质的DNA多态性很强，说明遗传变异很丰富，然而山葡萄种质间多态性不是很强。从各种质间相似系数来看，山葡萄群体间相似系数都在0.6以上，说明它们亲缘关系近。起源于俄罗斯的RS自聚为一组，说明其与东北山葡萄在地理起源上较远。 7、用9个引物对11份梨种质进行RAPD扩增，结果表明：梨的RAPD扩增结果获得了较强的多态性，在25％～100％之间，有一定的DNA多态性，扩增的条带数为4～9条，平均5.18条，扩增片段大小在300～4800bp之间。S38-500，S89-1200，S91-1800，S91-900，S93-1200，S93-600，S81-600，S82-1000，S86-1500，S86-1000，S86-900，为各种质的共有带。利用引物S23、S37、S38可鉴别供试梨种质资源。

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第一章 绪论

1.1果树资源及RAPD研究概况

1.1.1我国果树资源研究与利用

1.1.2吉林省果树资源开发与利用

1.1.3 RAPD标记在果树资源上的应用

1.2研究的目的和意义

第二章 材料与方法

2.1试验材料

2.2研究方法

2.2.1总DNA提取。

2.2.2反应条件的建立。

2.2.3 RAPD统计方法。

第三章 吉林省重要果树种质资源RAPD研究

3.1基因组DNA提取方法的研究

3.1.1材料与方法

3.1.2结果与分析

3.2 RAPD反应条件的建立

3.3吉林省重要果树种质资源RAPD标记

3.3.1东北小苹果RAPD分析

3.3.2越橘资源RAPD分析

3.3.3黑穗醋栗RAPD分析

3.3.4李、杏、樱RAPD分析

3.3.5东北猕猴桃种质RAPD分析

3.3.6抗寒葡萄种质RAPD分析

3.3.7梨种质资源RAPD分析

第四章 全文结论

4.1果树种质资源总DNA提取

4.2果树种质资源RAPD的反应体系和反应条件

4.3果树种质资源RAPD研究

4.3.1东北小苹果资源RAPD分析

4.3.2越橘种质资源RAPD分析

4.3.3黑穗醋栗RAPD分析

4.3.4李、杏、樱RAPD分析

4.3.5猕猴桃种质RAPD分析

4.3.6抗寒葡萄种质RAPD分析

4.3.7梨种质资源RAPD分析

参考文献

致 谢

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