河南华溪蟹金属硫蛋白原核表达载体的构建

摘要

本实验在克隆得到河南华溪蟹 (Sinopotamon henanense)金属硫蛋白(Metallothionein，MT)cDNA，将华溪蟹MTcDNA连接于T载体上得到PET-GST-MT的基础上，将其导入大肠杆菌DH5α中，以PET-GST-MT质粒为模板，PCR扩增目的片段，双酶切，胶回收纯化，连接至pGEM-T载体扩增，双酶切，亚克隆至pQE31载体，转入大肠杆菌BL21中。结果表明，PCR扩增目的片段产物大小符合要求，重组质粒pQE31-MT双酶切鉴定与其一致。