鲍曼不动杆菌blaNDM-1基因序列分析及表达

摘要

目的：研究NDM-1鲍曼不动杆菌厦门分离株耐药性产生的分子机制。方法：Vitek32测定耐药谱。根据Genbank发表blaNDM-1基因序列设计合成引物，利用PCR技术扩增NDM-1鲍曼不动杆菌的blaNDM-1结构基因及其上下游调控序列片段，连接T载体，转化至大肠杆菌DH5α，序列测定并进行BLAST分析比对。测定始发菌株与重组菌株对美洛培南的最小抑菌浓度。结果：药敏试验结果显示，该菌株对碳青霉烯类及β-内酰胺类抗生素耐药。NDM-1鲍曼不动杆菌厦门分离株blaNDM-1基因与HK-01同源性为1000%；与KP-05-506相比，在blaNDM-1和trpF之间有24bp的插入。美洛培南最小抑菌浓度测定结果表明，重组菌株DH5α(pMD18-T：：blaNDM-1)MIC值比始发菌株DH5α升高256倍。结论：获得blaNDM-1基因的大肠杆菌能够表达碳青霉烯酶，该基因是碳青霉烯类抗生素耐药性产生的分子基础，该基因具有跨种水平传播的可能。