B6-Co小鼠Ankrd55和Ddx4突变候选基因克隆及测序

摘要

目的：对B6-Co小鼠Ankrd55和Ddx4基因进行克隆测序分析，寻找是否存在突变位点。方法：以小鼠Ankrd55和Ddx4基因的mRNA序列设计引物，以mRNA为模板，采用RT-PCR和PCR技术分段进行目的基因扩增，将目的片段连接在T载体上，转化至感受态细胞，筛选阳性克隆，提取质粒DNA分子，电泳检测，EcoR I酶切释放目的片段，测序、分析、比对。结果：Ddx4基因位于小鼠13号染色体第113412349的碱基由C转换成A，导致编码氨基酸的密码子改变，产物脯氨酸(P)变成谷氨酰胺(Q)。结论：Ddx4基因发现单碱基突变，该突变与B6-Co小鼠EOB表型可能相关，有待于进一步研究。