16种人兽共患致病菌新型多重不对称PCR-电化学基因芯片法检测的研究

摘要

目的：建立一种基于多重不对称PCR-电化学基因芯片技术同时检测多种人兽共患致病菌的新方法. 方法：根据各种人兽共患致病菌常见靶基因的保守序列分别设计特异性引物和探针,建立优化多重PCR反应体系,再结合电化学基因芯片进行杂交检测,评价所建立的PCR-电化学基因芯片的特异性和敏感性. 结果：该方法可同时检测大肠杆菌O157、O104及O107、霍乱弧菌O139、结核杆菌、志贺氏菌、沙门氏菌、金黄色葡萄球菌、猪链球菌Ⅱ型及通用型、布鲁氏菌、李斯特菌、炭疽杆菌、丹毒杆菌、巴氏杆菌、鼠疫耶尔森氏菌,且具有高度特异性和良好的稳定性,灵敏度可达1×104copies/ml. 结论：本研究建立的多重不对称PCR-电化学基因芯片可同时检测多种人兽共患致病菌,并在性能验证中显示了良好的灵敏度和特异性,为人兽共患病的筛查、诊断和治疗提供新途径.