Angptl3基因敲除在阿霉素肾病中对肾脏保护作用的研究

摘要

目的:蛋白尿的发生与肾小球滤过屏障损伤密切相关,其中足细胞在滤过屏障损伤中的作用尤为重要.血管生成素样蛋白3(Angptl3)在足细胞中异常高表达与肾病综合症中的蛋白尿及足细胞足突融合密切相关;为进一步明确在肾病综合症中调节体内Angptl3表达对肾病综合症蛋白尿及足细胞影响,本实验利用Angptl3-/-小鼠通过肾病模型来探讨Angptl3基因敲除在肾病综合症中对肾脏的影响.方法:首先观察Angptl3-/-小鼠的一般情况，SDS-PAGE分析Angptl3-/-小鼠尿液白蛋白变化，分析血浆生化的改变，观察Angptl3-/-小鼠血浆白蛋白、胆固醇、甘油三酷及肝肾功能的变化，光镜下观察小鼠肝肾组织结构变化，电镜下观察Angptl3基因敲除后对足细胞超微结构的影响。取雌性Angptl3+/+小鼠和Angptl3-/-小鼠，8-12周龄，阿霉素以25mg/Kg经尾静脉注射;在阿霉素注射前及注射6天后进行眼眶后静脉丛取血，检测阿霉素注射前后血浆白蛋白、甘油三酷、胆固醇水平变化;分析阿霉素注射后小鼠尿液白蛋白变化;观察小鼠在阿霉素注射6天后肝肾组织结构的变化及足细胞超微结构的改变。结果:Angptl3一小鼠的活动、生长发育等一般情况没有发生异常改变，具有正常生殖功能，Angptl3-/-小鼠尿液白蛋白阴性;肾脏结构上没有发生异常改变，电镜下足细胞足突结构完整;阿霉素注射后Angptl3+/+小鼠出现大量蛋白尿、低蛋白血症和高胆固醇血症，Angptl3-/-小鼠尿Alb/Cr的比值较Angptl3+/+小鼠尿液Alb/Cr比值减少约80%，血浆白蛋白在阿霉素注射后没有发生明显改变，没有出现高胆固醇血症;透射电镜和扫描电镜下Angptl3-/-小鼠在阿霉素注射后足细胞足突结构完整，没有明显足突融合和微绒毛增生。结论:Angptl3基因敲除小鼠是一个较为理想的可用于研究肾脏病理的转基因小鼠;病理情况下，在肾病综合征中Angptl3基因敲除能够显著减轻肾病综合征尿白蛋白，防止高脂血症出现，对机体具有很好的保护作用。