猪γ-干扰素的分子克隆与在大肠杆菌中的表达

摘要

采用RT-PCR技术从猪血淋巴细胞总RNA中扩增出猪干扰素γ cDNA(SwIFN-γ).将其克隆到pMD18-T载体中,经过限制性酶切分析、测序证实扩增得到的SwIFN-γ与已报道的猪γ干扰素序列完全一致.将SwIFN-γ亚克隆入pGEX-KG表达载体,转化入宿主菌BL21,通过对宿主菌不同时间的诱导摸索出最佳表达时间,经IPTG诱导后,得到高效表达.包涵体纯化、变性、复性后经细胞病变抑制法测定结果表明重组猪IFN-γ具有较强的生物学活性.