髓样细胞表达的触发受体1抑制LPS应激下巨噬细胞的自噬

摘要

目的：观察髓样细胞表达的触发受体1(TREM-1)对脂多糖(LPS)应激下巨噬细胞自噬相关基因表达的影响. 方法：观察LPS应激下的巨噬细胞TREM-1蛋白的表达.分别选用TREM-1的激动剂(MAB1187)和TREM-1的拮抗剂(LR12)作用于巨噬细胞,利用qPCR检测巨噬细胞自噬相关基因ATG7、ATG5、ATG12及自噬标志蛋白微管相关蛋白1轻链3(LC3)mRNA的表达;采用Western Blot检测巨噬细胞TREM-1、LC3Ⅱ/Ⅰ、ATG7蛋白的表达;采用免疫荧光检测在LPS应激与TREM-1激活的情况下,巨噬细胞的自噬标志蛋白LC3表达. 结果：LPS(400ng/mL、1000ng/mL)应激下巨噬细胞TREM-1蛋白表达明显增加;LPS(1000ng/mL)作用巨噬细胞24h,巨噬细胞TREM-1蛋白表达达到峰值.LPS应激的巨噬细胞自噬基因ATG7、ATG5、ATG12及自噬标志分子LC3mRNA表达均降低;当给予TREM-1拮抗剂后,巨噬细胞的ATG7、ATG5、ATG12、LC3mRNA表达均升高,而采用TREM-1激动剂后,自噬基因表达被抑制.western Blot检测结果显示,TREM-1可抑制LPS应激下巨噬细胞LC3Ⅱ/Ⅰ、ATG7蛋白的表达.免疫荧光检测表明TREM-1激动剂可使巨噬细胞胞内的LC3蛋白表达量减少. 结论：巨噬细胞胞膜上TREM-1激活后,可使巨噬细胞自噬减弱,提示LPS应激下的巨噬细胞TREM-1可能通过抑制巨噬细胞的正常自噬从而发挥炎症放大作用.