血必净注射液对创伤后内皮细胞合成血管生成素2及血管内皮钙粘蛋白的影响

摘要

目的：使用细胞外热休克蛋白70(eHSP70)刺激内皮细胞模拟创伤,观察血必净注射液对创伤后内皮细胞血管生成素2(Ang-2)及血管内皮钙粘蛋白(VE-cadherin)变化的影响,探讨血必净注射液对血管内皮的保护作用. 方法：培养人脐静脉内皮细胞,采用RT-qPCR和Western blot检测eHSP70(终浓度为0.1ug/ml)刺激0、2、4、8、16及32h后细胞Ang-2、VE-cadherin的mRNA和蛋白表达量,找出最佳刺激时间,然后设空白对照组、eHSP70组、血必净组(终浓度为50mg/ml)、血必净+eHSP70(先加入终浓度为0.1ug/ml eHSP70刺激1h,再加入终浓度为50mg/ml血必净)组共四个实验组,采用RT-qPCR和Western blot检测最佳时间点各组Ang-2、VE-cadherin的mRNA和蛋白表达量改变. 结果：eHSP70刺激后,内皮细胞Ang-2的mRNA及蛋白表达量增加并于4h达到高峰,而内皮细胞VE-cadherin的mRNA和蛋白表达量经eHSP70刺激后降低,并于4h达到最低值.各实验组干预4h后,eHSP70组与血必净+eHSP70组细胞Ang-2的mRNA及蛋白表达量明显较空白对照组的表达量增高(P＜0.05),而血必净+eHSP70组Ang-2的mRNA及蛋白表达量较eHSP70组的表达量下降(P＜0.05);与空白对照组相比较,eHSP70组VE-cadherin的mRNA及蛋白的表达量明显降低(P＜0.05),而血必净+eHSP70组及血必净组VE-cadherin的mRNA及蛋白的表达量均明显上升(P＜0.05),其中尤以血必净组的表达增高最为显著(P＜0.05). 结论：eHSP70模拟的创伤刺激能导致损伤的内皮细胞Ang-2表达量增加,同时使细胞VE-cadherin表达量下降,血必净注射液通过调控eHSP70对Ang-2与VE-cadherin的表达影响,对创伤刺激的血管内皮细胞具有保护作用.