健脾清肠方调节PERK-eIF2α/NF-κB通路溃疡性结肠炎的机制研究

摘要

目的:探讨健脾清肠方(JPQCD)通过调节PERK-eIF2α/NF-κB信号通路抑制肠上皮细胞发生内质网应激,从而修复肠黏膜损伤,为临床治疗UC提供重要科学依据. 方法:将C57/BL6小鼠根据体重按照随机数字表随机分为4组:正常对照(Control)组、模型(DSS)组、中药健脾清肠方(JPQCD)组、5-氨基水杨酸(5-ASA)组.正常对照组给予正常饮用水,其它组均自由饮用5％DSS溶液,连续饮用7天.模型复制成功后进行药物干预,Control组和DSS组给予等量生理盐水灌胃,中药JPQCD组和5-ASA组分别给予JPQCD(15g/Kg/d)和5-ASA(100mg/kg/d)连续灌胃7天,药物干预结束后,断颈处死各组小鼠,收集结肠组织.HE染色观察各组小鼠结肠病理学变化,透射电镜观察结肠上皮细胞内质网应激超微结构,Western blotting法和Real Time-PCR法检测结肠组织PERK-eIF2α/NF-κB通路中GRP78、p-PERK、p-eIF2a、NF-κB蛋白表达和GRP78、PERK、eIF2a、NF-κB mRNA表达. 结果:与DSS组比较,JPQCD组模型小鼠病理组织可见糜烂粘膜表面上皮细胞移行修复,少量炎症细胞浸润,黏膜腺体基本恢复正常.透射电镜可见结肠上皮细胞空泡状结构数目减少,体积变小,内质网网膜腔轻度扩张,形态基本呈膜网状样.与Control组比较,DSS组结肠组织中GRP78、p-PERK、p-eIF2a、NF-κB等蛋白表达增加(P＜0.05);与DSS组比较,JPQCD组和5-ASA组结肠组织中GRP78、p-PERK、p-eIF2a、NF-κB等蛋白表达均减少(P＜0.05).与Control组比较,DSS组结肠组织GRP78、PERK、eIF2a、NF-κB mRNA表达均明显增加(P＜0.05);与DSS组比较,JPQCD组和5-ASA组结肠组织中GRP78、PERK、eIF2a、NF-κB mRNA表达均减少(P＜0.05). 结论:JPQCD可改善DSS诱导结肠炎小鼠结肠黏膜的损伤,其作用可能与调节PERK-eIF2α/NFqB信号通路.