促甲状腺激素受体基因多态性(D36H)与自身免疫性甲状腺疾病关系的研究

摘要

促甲状腺激素受体(thyrotropin receptor,TSHR)属G偶联蛋白受体家族,是自身免疫性甲状腺疾病(autoimmune thyroid disease,AITD)重要的自身抗原,TSHR的膜外部分具有免疫原性和配基结合位点,此区基因与AITD的分子发生机制可能有关.D36H是TSHR膜外区的一个点变异,国外研究认为,它是一个多态性改变;国内尚无此方面的报道.目的:本研究应用聚合酶链反应(PCR)——限制性片段长度多态性(RFLP)分析法,检测TSHR-D36H点变异在中国辽南地区汉族人群中的发生情况,并初步探讨它与AITD有无关联.方法:对已确诊的中国辽南地区汉族Graves病(GD)患者72例(男性15例,女性57例,平均年龄35±18岁)、桥本病(HT)患者58例(男性3例,女性55例,平均年龄36±19岁)和健康对照者50例(男性10例,女性40例,平均年龄33±19岁)进行D36H(G205C)变异分析.常规法提取其周围血白细胞中的DNA作为模板,参照TSHR全基因组顺序设计反应引物,PCR法扩增目的性TSHR基因片段(43~584位点),限制性内切酶Bsp1286I酶切检测G→C突变(D36H),用2.5﹪琼脂糖凝胶电泳观察结果,记录各组D36H变异检出例数,并比较各组D36H变异检出率.结果:72例GD患者中发现1例D36H变异者,检出率为1.38﹪;58例HT患者中发现2例,检出率为3.44﹪;50例健康对照者发现1例,检出率为2.00﹪.4例D36H点变异的等位基因型均呈GC杂合型.GD组与HT组之间(x<'2>=0.036;P>0.05)以及二者与健康对照组间的TSHR-D36H检出率无统计学差异(GD与对照组x<'2>=0.215;HT组与对照组x<'2>=0.017;P>0.05);AITD组(GD+HT)与对照组之间D36H检出率也无统计学差异(2.31﹪ VS.2.00﹪,x<'2>=0.192;P>0.05).结论:D36H在AITD患者及健康人群中均有发生,是一个多态性位点,与AITD的发生无关联.但不能排除D36H变异与其他TSHR基因变异位点及环境因素间相互作用致病的可能性.