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电泳法测定大鼠血浆中骨特异性碱性磷酸酶活性

摘要

目的:虽然我国居民膳食中某些微量营养素摄入不足影响少年儿童体格发育的问题已经得到预防医学界的普遍认可和重视,但是,如何准确、灵敏的评价机体的骨骼发育状况,仍然需要建立一些简便、灵敏的生化指标。骨碱性磷酸酶(Bone alkaline phosphatase,简称BALP)是成骨细胞分泌的酶,它能及时反映骨细胞活性及骨骼钙化过程。本实验旨在建立一种简便灵敏准确的方法,对大鼠血浆中骨特异性碱性磷酸酶(Bone alkaline plaosphatase,BALP)的活性进行测定。rn 方法:采用聚丙烯酰胺凝胶(PA)电泳法检测BALP活性。以纯化的BALP作为标准品,进行回收率测定和精密度检验。rn 结果:此方法测定大鼠血浆中BALP可得到准确的结果:(1)以标准BALP加入量对实际测定光密度值作图,可见有良好的直线关系(r=0.9986,P<0.05)。(2)标准回收率范围为93.8%~100.34%。(3)对同一样品进行10次测定,其变异系数为4.4%。(4)实际样品测定中缺锌组BALP显著低于对喂组和对照组,而缺锌组与对照组和对喂组的总ALP也有差别。rn 结论:本研究建立一种电泳方法检测大鼠血浆中的BALP,实验证实该方法操作简便,具有良好的准确性和精密度。

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