魏氏梭菌贵州分离株α-毒素基因的克隆与表达

摘要

提取已鉴定的A型魏氏梭菌贵州分离株的染色体DNA,经酶切回收2~4Kb的DNA片段混合物,将其插入质粒载体pUC19中,并转化至E.coliJM109,通过Amp抗药性和显色反应的选择,再提取阳性重组细菌质粒进行探针检测、酶切分析和PCR鉴定,筛选出含魏氏梭菌α-毒素基因的重组大肠杆菌;经溶血与溶血抑制试验及SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳证实,重组E.coli的表达产物符合α-毒素的生物学特性.

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