HIV1+2型抗体化学发光免疫检测试剂盒研制

摘要

目的:建立检测HIV1+2抗体化学发光免疫分析方法并研制其试剂盒.方法:应用HIV-1的gp41和gp120,HIV-2的gp36蛋白混合包被化学发光微孔板作为固相抗原;用辣根过氧化物酶(HRP)标记以上抗原,应用Luminol及其增强剂的化学发光底物作示踪剂,通过条件优化建立检测血清或血浆中HIV-1+2抗体的双抗原夹心化学发光免疫分析法.应用该方法制备HIV1+2抗体化学发光诊断试剂盒三批,分别检测中国药品生物制品检定所(中检所)HIV抗体国家参考品,并与国内市场主要产品进行对比.结果:建立了HIV1+2抗体化学发光诊断试剂盒(双抗原夹心法).用中检所HIV抗体国家参考品检测,该方法研制的三批试剂盒均符合质量标准.与万泰公司的HIV-ELISA试剂盒比较,该方法所研制的诊断试剂在灵敏度和精密性上较好.检测196份HIV1/2感染血清,226份其他疾病患者血清和正常人血清,阳性和阴性符合率均100％,与万泰HIV-ELISA试剂比较,相关性达0.9941.三批变异系数均小于10％.试剂盒于37℃放置6d后,检测结果的阴阳性判断不受影响.结论:本法特异性强,灵敏度高,精密性及稳定性好,适用于血液的筛查和临床HIV感染的检测.