利用灌注型生物反应器促进干细胞在大段磷酸三钙载体内扩增

摘要

目的利用灌注型生物反应器促进骨髓基质干细胞在大段磷酸三钙载体内扩增,探讨灌注培养法体外构建大段细胞-载体复合物的可行性. 方法对复合羊骨髓基质干细胞的大段磷酸三钙载体进行动态灌注培养(动态培养组)1、2、4周或传统静态培养(静态培养组)2、4周,观察、检测干细胞在载体内的扩增情况. 结果通过葡萄糖日耗量、细胞活性(MTT比色法)检测以及电镜观察、硬组织切片观察、计量后发现:在动态灌注培养下,骨髓基质干细胞能够在大段载体中心及周缘存活并增殖,细胞数量随着培养时间的延长而增加,细胞快速增殖发生在前2周,而在后2周细胞的增殖速度明显减慢.与动态培养组相比,在静态培养下,骨髓基质干细胞仅能在载体周缘存活增殖,细胞数量明显少于动态培养组,细胞的增殖主要发生在前2周,而在后2周细胞数量基本保持不变. 结论灌注型生物反应器能确保大段磷酸三钙载体内的营养供应和气体交换,使骨髓基质干细胞在三维载体内存活并扩增,提高细胞在载体内的复合效率.