酿酒酵母SAM合成酶基因的克隆及表达

摘要

目的：酿酒酵母S-腺苷甲硫氨酸(SAM)合成酶基因在大肠杆菌中的克隆和表达。rn 方法：以酿酒酵母2B-41的染色体DNA为模板，根据GenBank上已登录的S-腺苷甲硫氨酸合成酶基因设计特异性引物进行PCR扩增，获得目的基因DNA片断。将此基因克隆到原核表达载体pET-28a并转化大肠杆菌BL21(DE3)。rn 结果：经IPTG诱导和聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)分析，有一条约为47kD的外源蛋白条带出现，表达量可达到菌体总蛋白含量的23.3％。目标基因表达产物主要以包涵体的形式存在。rn 结论：酿酒酵母S-腺苷甲硫氨酸(SAM)合成酶基因可在大肠杆菌中的克隆和表达。