MEBT/MEBO动态调节大鼠慢性难愈合皮肤创面肉芽组织中p38、MK2蛋白及基因表达

摘要

目的：通过动态观察大鼠慢性难愈合皮肤创面肉芽组织中p38、MK2蛋白及基因表达变化,从p38信号通路角度探讨皮肤再生医疗技术(MEBT/MEBO)对大鼠慢性难愈合皮肤创面的可能修复机制.rn 方法：实验一：以40只SD大鼠为研究对象,随机分为MEBO组、贝复济组、模型组、空白组,每组各10只,依据文献复制了大鼠体表皮肤溃疡模型.造模后第二天用药,观察创面愈合时间及愈合率;实验二：SD大鼠80只,随机分为4个组,每组20只,同实验一造模方法,造模后第3d,7d,14d各组随机处死5只大鼠,取相同部位皮肤溃疡创面肉芽组织,采用Western blotting和Real-Time PCR技术检测p38、MK2蛋白及其mRNA水平表达差异.rn 结果：(1)Western blotting检测结果：①在整个创面愈合过程中,纵向比较,P38、MK2总蛋白表达量在同个时相点各组差异无统计学意义(P＞0.05),横向比较,在造模后第3天表达最高,其次逐渐下降;②在创伤早期,模型组、MEBO组、贝复济组创面组织中p-p38、p-MK2表达差异无统计学意义(P＞0.05);在造模后第7天,各组间的差异开始明显,空白组、MEBO组、贝复济组表达量开始显著下降,模型组下降趋势不明显,各组两两比较差异有统计学意义(P＜0.05);造模后第14天,相比其他三组,模型组表达量仍处于较高水平(P＜0.05),MEBO组和贝复济组差异无统计学意义(P＞0.05);(2)RT-PCR检测结果：①在整个实验过程中,与空白组相比,MEBO组、贝复济组、模型组的P38mRNA、MK2mRNA表达量在第3天时最多,随后持续下降;②造模后第3天,各组差异无统计学意义(P＞0.05);造模后第7天,MEBO组、贝复济组的表达量下降趋势明显,两组之间有明显统计学差异(P＜0.05);造模后第14天,MEBO组、贝复济组的表达量持续下降,两组之间无统计学差异(P＞0.05),但与模型组相比均有差异(P＜0.05),模型组仍处于高表达.rn 结论：(1)MEBO能明显缩短大鼠慢性难愈合创面的愈合时间,下调p38和MK2磷酸化及其mRNA表达水平.(2)慢性难愈合创面难迟缓愈合与p-p38和p-MK2高水平表达有关,MEBO能促进慢性难愈合创面的作用机制之一可能是通过下调p38MAPK信号通路中p38和MK2磷酸化水平,阻断部分信号转导,抑制p38MAPK信号通路被过度激活的状态,从而促进大鼠慢性难愈合创面的愈合.