UFLC/MS-IT-TOF测定不同细菌对头孢他定的敏感性差异及头孢他定质谱裂解规律推断

摘要

头孢他定(ceftazidime)为第三代头孢菌素类抗生素，结构式如图1，头孢他定对大多革兰阳性和阴性菌都有抗菌活性，曾为抗铜绿假单胞菌首选药物，且对β-内酰胺酶有较高稳定性，对肾脏基本无毒，因此在临床中较为常用. 文献报道采用反相离子对色谱法测定注射用头孢他定，该方法由于使用离子对试剂，实验中容易污染质谱仪，因此不适于质谱分析；而关于体液中的头孢他定测定的也有报道，主要是采用HPLC和胶束电动毛细管电泳(MEKC)方法，但此类方法的专属性及灵敏度有一定缺陷.虽然头孢类抗生素的质谱分析研究有过相关研究，而对于测定细菌培养液中的头孢他定未见有文献报道.单一的高效液相色谱分析无法排除细菌培养液中的基质干扰，影响细菌培养液中的头孢他定的含量测定.本实验建立了UFLC/MS-IT-TOF联用方法快速检测细菌培养液中的头孢他定，UFLC实现了各物质的快速分离，通过IT-TOF的高分辨及高质量精度功能，排除了其他杂质对头孢他定测定的干扰，并利用IT-TOF的多极质谱功能对头孢他定进行了结构确认，对其质谱裂解途径进行了探讨.同时本实验还考察了非产酶大肠埃希菌、铜绿假单胞菌和产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)肺炎克雷伯菌对头孢他定的敏感性差异.