福氏志贺菌2a多药耐药基因marA的克隆及其原核表达

摘要

对福氏志贺菌2a多药耐药相关基因marA进行克隆和原核表达。参考福氏志贺菌2a marA基因序列。设计一对特异引物，在引物的51和31端分别加入含有BamH I和Sal I限制性酶切位点序列，以福氏志贺菌2a菌株基因组DNA为模板，PCR扩增marA基因并与pMDl8-T载体连接，转化DH5a。提取重组质粒pMD18-marA，经BamHI/SMlI双酶切并与载体pET30a连接，转化宿主菌BL21(DE3)PLys，.IPTG诱导表达目的蛋白。经SDS-PAGE及Western Blotting检测和鉴定，结果表明重组载体pET,-30a-marA可成功地在大肠杆菌中表达MarA蛋白。该研究为了解MarA蛋白的特性、功能以及对福氏志贺菌多药耐药机理的深入研究奠定了基础。