补肾活血法促进TGF-β2基因修饰的ADSCs向软骨细胞分化的作用和机制的实验研究

摘要

目的：研究脂肪源性成体干细胞(ADSCs)体外增殖特性、表型特征及多向分化能力,探索补肾活血中药干预对组织工程软骨构建的作用及其机制.rn 方法：取SD大鼠双侧腹股沟部的脂肪垫,分离培养ADSCs,以流式细胞仪检测原代ADSCs和筛选标志物表达.在二维培养的方式下将大鼠ADSCs进行成脂、成骨、成软骨、成神经元诱导,观察其成脂、成骨、成软骨、成神经元能力并予以鉴定.分为四组:空白对照组、单纯中药组、基因转染组和中药+基因转染组。通过形态学观察、行HE、甲苯胺蓝染色、PCR、WB及Ⅱ型胶原和蛋白多糖免疫组化染色鉴定软骨细胞表型。rn 结果:从SD大鼠脂肪组织可以获得纯度较高的ADSCs，而且具有良好的增殖能力，能够进行传代培养并能保持其特性。rn 结论:1.自SD大鼠腹股沟取材可以获得纯度较高的ADSCs，经过传代培养ADSCs的纯度可以得到进一步的提高，ADSCs表达特异的表面分子，具有极强的自我更新能力和多向分化潜能。2.ADSCs具有成脂、成骨、成软骨、成神经元分化的潜能并可高效诱导为脂肪细胞。3.补肾活血中药可促进ADSCs的增殖，合并TGFβ-2可促进ADSCs向软骨细胞分化。