猪瘟病毒E2亚单位蛋白与集落刺激因子的融合表达及其免疫效果分析

摘要

优化了工程菌BL21-E2 A/D-GM-CSF(含有783 bp的E2 A/D-GM-CSF融合基因)的原核表达条件，结果表明诱导的最佳时间和诱导剂IPTG的最佳用量分别为4 h和0.8 mmol/L。在此基础上，大量诱导表达融合蛋白后经Ni-IDA蛋白质层析柱纯化，Western-blot鉴定纯化蛋白具有抗原活性。将融合蛋白与福氏佐剂制成亚单位疫苗后免疫试验小鼠，并与E2 A/D蛋白、猪瘟兔化弱毒疫苗(HCLV)进行免疫效果比较，结果显示E2 A/D-GM-CSF亚单位疫苗免疫小鼠后能够产生抗猪瘟抗体，并且抗体水平明显高于E2-A/D免疫组和HCLV免疫组。研究表明GM-CSF经融合表达后对E2-A/D蛋白有显著的免疫增强作用。