BDNF基因修饰骨髓间充质干细胞的生物学特性及对豚鼠螺旋神经元的保护作用

摘要

目的：构建pegfpN1-BDNF真核表达载体，为体外构建基因工程细胞奠定基础。rn 方法：RT-PCR扩增人胚胎脑组织脑源性神经营养因子(BDNF)基因片段，将基因片段与pegfpNl质粒连接制成重组质粒。转化、筛选及扩增重组质粒，用EcoR Ⅰ和BamH Ⅰ酶切分析鉴定BDNF是否插入重组质粒。小量提取重组质粒后进行测序分析，将酶切检测和测序正确的pegfpN1-BDNF重组质粒用QIAGEN-TIP100大量提取。rn 结果：经酶切鉴定，成功地将BDNF与pegfpN1质粒连接，构建我们需要的pegfpN1-BDNF重组质粒。rn 结论：成功构建了pegfpN1-BDNF重组真核表达载体，为体外实验做好准备。