血翻译因子TEF-1δ表达作为新的镉暴露生物标志物的慢性体内研究

摘要

目的：近年来,翻译延伸因子1d(the mouse translation elongation factor-1d,TEF-1δ)被鉴定这一个新的鼠属镉应答原癌基.然而,TEF-1δ基因是否可怍为潜在的镉暴露生物标志物尚未见报道.本实验通过创建大鼠慢性镉暴露模型,对血TEF-1δ的表达改变是否可以作为新的镉暴露生物标志物进行研究.rn 方法：我们用SPF级别SD大鼠按体重随机区组分为4组,每组24只大鼠,通过腹腔注射不同剂量CdCl2染毒,每周染毒5次,连续14周.所有的大鼠分别置于代谢笼中收集24小时尿液,然后收集血液和内脏器官.血液和器官组织用原子分光光度计测定其镉的含量并提取总RNA,再用逆转录PCR(RT-PCR)和荧光定量PCR(FQ-PCR)法分析其TEF-1δ因子的表达水平.测定血清丙氨酸转氨酶(ALT)和谷草转氨酶(AST)作为肝功能生化指标,测定血中尿素氮(BUN)、血肌酐(SCR)、尿肌酐(CR)以及24小时尿蛋白作为肾功能生化指标.最后,对血中TEF-1δ因子表达水平与血镉、肝镉、肾镉含量以及肝功能和肾功能指标分别作相关性分析.rn 结果：大鼠经过不同镉浓度染毒14周后,镉在实验组大鼠血、肝、肾中的蓄积浓度与对照组相比的差异有统计学意义,镉的暴露水平与镉在大鼠血、肝、肾中的蓄积浓度有明显的剂量依赖关系(P<0.05).镉染毒的大鼠中肝功能生化指标(AST,ALT)和肾功能生化指标(24hpro,BUN,SCR)与对照组相比均有统计学差异(P<0.05)a这些数据显示CdCl2染毒剂量已经引起肝肾功能损害.经RT-PCR分析,血TEF-1δ因子表达量以β-actin为内参照进行标化订算,初步显示CdCl2染毒的大鼠血中TEF-1δ的mRNA表达水平与对照组比较,均呈现明显升高趋势,并与镉暴露浓度成剂量依赖关系(P<0.05). FQ-PCR定量检测结果进一步证实,TEF-1δ表达量是以hACTIN为内参照进行标化计算,低、中、高剂量组的.TEF-1δ相对拷贝数分别是对照组的2.5倍、4.2倍和23.5倍,且镉的暴露浓度与TEF-1δ表达水平呈明显的剂量依赖关系(P<0.05).此外,大鼠血中的TEF-1δ的mRNA表达水平与镉在鼠血、肝、肾中的蓄积浓度有正相关关系.大鼠血中的TEF-1δ的mRNA表达水平与肝功能生化指标(AST,ALT)和肾功能生化指标(24hpro,BUN,Scr)异常也存在明显正相关.结果表明,血中TEF-1δ因子表达水平与大鼠的血、肝、肾组织的镉暴露水平及其引起的异常效应呈现出良好的剂量依赖关系及剂量一效应关系.rn 结论：这些数据让我们首次发现,血TEF-1δ的表达改变可成为一个新的、有价值的镉暴露生物标志物,也进一步揭示了血TEF-1δ的表达异常有可能作为一个不错的内脏器官镉暴露的替代标志物.