根癌农杆菌介导广藿香遗转转化体系的建立及优化

摘要

目的：建立起根癌农杆菌介导的广藿香遗转转化体系。方法：以广藿香无菌苗的子叶为外植体，利用携带质粒pBI121 的根癌农杆菌菌株LBA4404进行诱导，并对遗传转化过程的多个因素进行优化。结果：根癌农杆菌介导的最佳广藿香遗转转化体系为选取无菌苗的子叶作为外植体，转接至分化培养基MS+6-BA2.0 mol·L-1+NAA0.1 mol·L-1上进行预培养2d，用OD600＝0.3的农杆菌浓度侵染15 min，共培养3d，再转接到筛选培养基MS+6-BA2.0 mol·L-1+NAA0.1 mol·L-1+Carb 500 mol·L-1 +Kan 30 mol·L-1进行培养;对所获得的13株抗性植株进行PCR扩增，其中阳性植株为10株。结论：已成功建立起根癌农杆菌介导的广藿香遗转转化体系，为利用转基因技术进行广藿香的抗病育种奠定基础。