一种基因编辑工具及其制备方法与多轮基因编辑的方法

摘要

一种基因编辑工具及其制备方法与多轮基因编辑的方法，属于基因工程技术领域。针对现有多轮基因编辑方法费时费力的问题，本发明提供了一种基因编辑工具，包括如下三种sgRNA表达母质粒：pRock系列母质粒、pPaper系列母质粒和pScissors系列母质粒，其中，每种母质粒除能表达用于编辑目的基因的sgRNA外，还能表达靶向另外两种母质粒中的一种的sgRNA；在实施基因编辑过程中，由上述三种母质粒构建的基因编辑质粒循环使用时，宿主细胞中先使用的基因编辑质粒或筛选标记被后使用的基因编辑质粒所消除。本发明缩短了编辑周期、加快了多轮基因编辑速度，更少的培养次数还可以减少基因组自发突变的可能。