一种治疗脑梗死的中药复方组合物及其制备方法

摘要

本发明属于中草药技术领域，公开了一种治疗脑梗死的中药复方组合物及其制备方法。该方剂是由君药黄芪，臣药当归、赤芍，佐药北柴胡、川芎、桃仁、红花和石菖蒲，配伍而成。本发明基于中医辨证论治理论，针对缺血性中风急性期的病机特点，选择纯天然药物进行配伍，具有益气活血、开通玄府之功，全方通补兼施，达扶正祛邪，通络护脑之效。该方剂动物实验研究表明还具有减少梗死面积、改善神经功能、保护线粒体、抑制焦亡的脑保护功效，适用于脑梗死急性期。

说明书

技术领域

本发明属于中草药技术领域，具体涉及一种治疗脑梗死的中药复方组合物及其制备方法。

背景技术

脑梗死，属于中风、卒中范畴，相当于缺血性中风，在脑血管病中所占比例较高，超过80％，可发生于任何年龄段，多见于45-70岁中老年人，发病较急，具有极高的致残率和病死率，已成为国民首位死亡原因。脑梗死患者会出现部分或不完全丧失活动能力，给个人、家庭和社会带来沉重的负担。因此，研究治疗脑梗死的有效药物，以延缓脑梗死进程及缓解病情，尤为重要。

中医历代医家对于中风的治疗原则多主张醒神开窍、祛风通络、活血化痰等。近年临床研究表明，风、火、痰、瘀、气虚、阴虚是缺血性中风常见证候要素，风痰瘀的患者临床较早出现气虚证，要注重补气扶正的治疗。同时，“气虚”也是中风发病的始动因素和关键，研究发现气虚证出现越早神经功能损伤越重，预后越差，提示应及早采取益气活血法治疗有助于改善预后。扶正有助于祛邪，以保护病灶周边的脑髓，而邪气不除，正气愈虚，因此，扶正祛邪是中风病急性期的治疗法则。

目前市面上有很多治疗脑梗死的中药复方，但是大部分具有益气活血功效的中药复方都是针对脑梗死恢复期。本发明针对脑梗死急性期的证候特点，研制出一种治疗脑梗死急性期的中药组合物。

发明内容

为了解决现有技术中多是用于治疗脑梗死恢复期的方剂，但是并未有关于脑梗死急性期的类似方剂和产品以及研究的出现，本发明目的在于提供一种治疗脑梗死急性期的具有益气活血、调畅气机、开通玄府功效的中药复方组合物及其制备方法。

本发明所采用的技术方案为：一种治疗脑梗死的中药复方组合物，所述组合物主要由以下质量份数的原料制备得到：

黄芪10-35份，当归5-15份，桃仁5-15份，红花5-15份，赤芍10-20份，北柴胡5-15份，川芎5-10份和石菖蒲5-15份。

该发明针对脑梗死这一证候特点，研制出一种治疗脑梗死的中药组合物。方剂由黄芪、当归、桃仁、红花、赤芍、北柴胡、川芎、石菖蒲组成。本方重用生黄芪，补脾气，气行则血行，令瘀去络通，为君药。当归，活血养血，具有化瘀而不伤血之妙，赤芍活血散瘀，共为臣药；桃仁、红花、川芎活血化瘀，共助臣药行气散瘀，在益气活血基础上加入柴胡、石菖蒲，意在调畅气机，开通玄府。柴胡针对虚气留滞取其升发、理气之特长，使其补而不滞；石菖蒲针对急性期病理产物之痰浊”及脑之“玄府开合不利”，起到化痰开窍、开通玄府之效，均为佐药；因此本方适用于中风病急性期的治疗，可益气活血、调畅气机、开通玄府，达扶正祛邪护脑之效。

作为优选地，所述组合物主要由以下质量份数的原料制备得到：

黄芪15-30份，当归8-12份，桃仁8-12份，红花8-12份，赤芍13-18份，北柴胡8-12份，川芎6-8份和石菖蒲8-12份。

作为优选地，所述组合物包括颗粒制剂和/或液态制剂。

一种治疗脑梗死的中药复方组合物的制备方法，在所述治疗脑梗死的中药复方组合物为颗粒剂时，包括按照相应比例选取黄芪、当归、桃仁、红花、赤芍、北柴胡、川芎和石菖蒲经粉碎、过筛、混合，造粒，获得颗粒制剂。

作为优选地，所述粉碎、过1200-1800目滤筛。

一种治疗脑梗死的中药复方组合物的制备方法，在所述治疗脑梗死的中药复方组合物为液态制剂时，包括按照相应比例选取黄芪、当归、桃仁、红花、赤芍、北柴胡、川芎和石菖蒲经浸泡、煎煮、过滤，获得液态制剂。

作为优选地，所述煎煮温度为85-100摄氏度。

作为优选地，所述煎煮时长为30-45分钟。

作为优选地，所述过2200-2800目滤网。

本发明的有益效果为：

(一)本方重用生黄芪，补脾气，气行则血行，令瘀去络通，为君药。当归，活血养血，具有化瘀而不伤血之妙，川芎为血中气药，活血行气；在益气活血基础上加入柴胡、石菖蒲，意在调畅气机，开通玄府。柴胡针对虚气留滞取其升发、理气之特长，使其补而不滞；石菖蒲针对急性期病理产物之痰浊”及脑之“玄府开合不利”，起到化痰开窍、开通玄府之效，均为佐药。

(二)本方适用于中风病急性期的治疗，可益气活血、调畅气机、开通玄府，达扶正祛邪，通络护脑之效。

(三)本发明是针对中风病急性期而设，尤其低灌注型脑梗死。急性期最重要的是改善脑组织水肿，保护脑细胞、抑制细胞死亡，此阶段的治疗尤为关键，与神经功能恢复和疾病的预后密切相关。对于临床常见灌注不足引起的脑梗死，中医认为由于年老体衰，劳累过度，气虚推动无力，血行不畅，瘀血内生，阻于血脉，脑窍失养，发为中风；中医治以益气活血，可达扶正祛邪，通络护脑之功效。

(四)本发明中药复方具有益气活血、调畅气机、开通玄府之效，全方通补兼施，实验研究表明本方还具有减少梗死面积、改善神经功能、保护线粒体、抑制焦亡及神经修复的脑保护功效，适用于脑梗死急性期。

附图说明

图1为造模前各组各时间点体重比较示意图；

图2为各组1d、3d、7d的mNSS评分示意图；

图3为各组造模前，1d，3d，7d转棒仪运动疲劳时间示意图；

图4为各组造模前，1d，3d，7d抓力测试；

图5为各组大鼠脑组织TTC染色结果示意图；

图6为各组大鼠脑组织梗死面积示意图。

图中：S：sham；M：model；Y：YQHY。

具体实施方式

下面结合具体实施例对本发明做进一步阐释。本领域技术人员将会理解，下列所描述的实施例是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例，仅用于说明本发明，而不应视为限制本发明的范围。所用试剂均为可以通过市售购买获得的常规产品。

实施例1：

一种治疗脑梗死的中药复方组合物的制备方法，在所述治疗脑梗死的中药复方组合物为颗粒剂时，包括按照相应比例选取黄芪100克、当归50克、桃仁 50克、红花50克、赤芍100克、北柴胡50克、川芎50克和石菖蒲50克经粉碎、过1200目滤筛、混合，造粒，获得颗粒制剂。

一种治疗脑梗死的中药复方组合物的制备方法，在所述治疗脑梗死的中药复方组合物为液态制剂时，包括按照相应比例选取黄芪100克、当归50克、桃仁50克、红花50克、赤芍100克、北柴胡50克、川芎50克和石菖蒲50克经浸泡、在85摄氏度下煎煮45分钟、过2200目滤网，获得液态制剂。

实施例2：

一种治疗脑梗死的中药复方组合物的制备方法，在所述治疗脑梗死的中药复方组合物为颗粒剂时，包括按照相应比例选取黄芪350克、当归150克、桃仁150克、红花150克、赤芍200克、北柴胡150克、川芎100克和石菖蒲150 克经粉碎、过1800目滤筛、混合，造粒，获得颗粒制剂。

一种治疗脑梗死的中药复方组合物的制备方法，在所述治疗脑梗死的中药复方组合物为液态制剂时，包括按照相应比例选取黄芪350克、当归150克、桃仁150克、红花150克、赤芍200克、北柴胡150克、川芎100克和石菖蒲 150克经浸泡、在100摄氏度下煎煮30分钟、过2200目滤网，获得液态制剂。

实施例3：

一种治疗脑梗死的中药复方组合物的制备方法，在所述治疗脑梗死的中药复方组合物为颗粒剂时，包括按照相应比例选取黄芪150克、当归80克、桃仁 80克、红花80克、赤芍130克、北柴胡80克、川芎60克和石菖蒲80克经粉碎、过1200目滤筛、混合，造粒，获得颗粒制剂。

一种治疗脑梗死的中药复方组合物的制备方法，在所述治疗脑梗死的中药复方组合物为液态制剂时，包括按照相应比例选取黄芪150克、当归80克、桃仁80克、红花80克、赤芍130克、北柴胡80克、川芎60克和石菖蒲80克经浸泡、在85摄氏度下煎煮45分钟、过2800目滤网，获得液态制剂。

实施例4：

一种治疗脑梗死的中药复方组合物的制备方法，在所述治疗脑梗死的中药复方组合物为颗粒剂时，包括按照相应比例选取黄芪300克、当归120克、桃仁120克、红花120克、赤芍180克、北柴胡120克、川芎80克和石菖蒲120 克经粉碎、过1800目滤筛、混合，造粒，获得颗粒制剂。

一种治疗脑梗死的中药复方组合物的制备方法，在所述治疗脑梗死的中药复方组合物为液态制剂时，包括按照相应比例选取黄芪300克、当归120克、桃仁120克、红花120克、赤芍180克、北柴胡120克、川芎80克和石菖蒲 120克经浸泡、在100摄氏度下煎煮30分钟、过2800目滤网，获得液态制剂。

实施例5：

一种治疗脑梗死的中药复方组合物的制备方法，在所述治疗脑梗死的中药复方组合物为颗粒剂时，包括按照相应比例选取黄芪200克、当归100克、桃仁100克、红花100克、赤芍150克、北柴胡100克、川芎70克和石菖蒲100 克经粉碎、过1800目滤筛、混合，造粒，获得颗粒制剂。

一种治疗脑梗死的中药复方组合物的制备方法，在所述治疗脑梗死的中药复方组合物为液态制剂时，包括按照相应比例选取黄芪200克、当归100克、桃仁100克、红花100克、赤芍150克、北柴胡100克、川芎70克和石菖蒲 100克经浸泡、在100摄氏度下煎煮30分钟、过2200目滤网，获得液态制剂。

服用方法：颗粒制剂：一袋/次，一日2次，一袋13.7克。

液态制剂：150ml/次，一日2次。

实验例：

动物药效学实验：

一、材料与方法

1.动物：清洁级雄性SD大鼠(260-280g)所有大鼠均分笼适应性喂养一周，室温24℃～26℃，昼夜各12h，自由饮水进食。

2.分组：将30只雄性SD大鼠(260-280g)随机分为假手术组、MCAO模型组、实验组(即本申请实施例5制备得到的颗粒制剂)，每组各10只。

3.MCAO模型的建立：参照改良线栓法制备大脑中动脉阻塞大鼠模型。假手术组除不插硅胶线外，其它操作与模型组相同；清醒活动30min后行神经功能评分。

神经功能缺损评分参照Longa及Bederson评分标准。0分：正常；1分：自发行走时偏向左而不能走直线，轻度局灶神经功能丧失；2分：自发行走时向左侧轻度打转，中度局灶神经功能丧失；3分：自发行走时向左侧明显打转，重度局灶神经功能丧失；4分：爬行时向左侧倾倒或不能自发行走，有意识丧失。1-3分为建模成功，0分、4分淘汰。

4.干预方法：MCAO模型组、实验组均建立MCAO模型，造模后6h给药。假手术组和模型组每天给予双蒸水0.5ml/100g灌胃，实验组每天给予颗粒剂0.1 ml/10g(2g生药/ml)灌胃，观察7天。

5.指标检测

(1)体重观察各组每天的体重变化。

(2)神经功能缺损评分：依据上述神经功能缺损评分方法，评价各时点各组大鼠神经功能缺损程度。

(3)转棒仪检测大鼠运动能力

分别于给药后24h、3天、7天进行转棒仪检测，每次留取3个数值，取平均值纳入统计。

(4)前肢抓力检测

分别于给药后24h、3天、7天进行大鼠前肢抓力的测试，每次留取3个数值，取平均值纳入统计。

二、结果

1、上述实施例5制备得到的颗粒制剂对体重的影响

如图1所示，为造模前各组各时间点体重比较示意图。图1中，注：n＝10。 S：Sham：假手术组；M：model：MCAO模型组；Y：YQHY：实验组。与假手术组比较，*p<0.05,**p<0.01；与模型组比较，#p<0.05，##p<0.01。

图1所示结果：假手术组体重呈上升趋势，造模前各组间体重比较无统计学差异；造模后各时点，模型组和实验组体重低于假手术组(P<0.01)；给药后5天，6天，7天，实验组体重高于模型组(P<0.01，P<0.05)；实验组体重在各时点组间比较无差异。

2、上述实施例5制备得到的颗粒制剂改善MCAO大鼠的神经功能

如图2所示，为各组1d、3d、7d的mNSS评分示意图。图2中，注：n＝10。 S：Sham：假手术组；M：model：MCAO模型组；Y：YQHY：实验组。与假手术组比较，*p<0.05，**p<0.01；与模型组比较，#p<0.05，##p<0.01；与1d 比较+p<0.05，++p<0.01。

图2所示结果：采用改良大鼠神经功能缺损评分(mNSS)对大鼠神经功能进行评价，造模后1天，各组mNSS评分比较无统计学意义；假手术组不做mNSS 评分比较；与模型组比较，给药后3天、7天，实验组可改善mNSS评分(P<0.01)；实验组在给药后7天对神经功能改善明显，低于造模后1天(P<0.05)。

3、上述实施例5制备得到的颗粒制剂改善MCAO大鼠的运动能力

如图3所示，为各组造模前，1d，3d，7d转棒仪运动疲劳时间示意图。图 3中，注：n＝10。Sham：假手术组；model：MCAO模型组；YQHY：实验组。与假手术组比较，*p<0.05，**p<0.01；与模型组比较，#p<0.05，##p<0.01；与造模前比较△p<0.05，△△p<0.01；与1d比较+p<0.05，++p<0.01；与3d比较☆p<0.05，☆☆p<0.01。

图3所示结果：与假手术组对比，模型组大鼠在造模后1d，3d，7d，转棒仪(Rota-rod)测试运动时间明显缩短(P<0.01)，组间与模型组比较，实验组给药3d和7d可以明显延长小鼠的运动时间(P<0.01)。组内各时点比较，造模7d运动时间低于给药1d(P<0.05)；与给药1d相比，实验组给药3d和7d 后可以明显延长小鼠的运动时间(P<0.05)，与给药3d相比，实验组给药7d 后可以明显延长小鼠的运动时间(P<0.05)。

4、上述实施例5制备得到的颗粒制剂改善MCAO大鼠的肢体抓力

如图4所示，为各组造模前，1d，3d，7d抓力测试示意图。图4中，注： n＝10。Sham：假手术组；model：MCAO模型组；YQHY：实验组。与假手术组比较，*p<0.05，**p<0.01；与模型组比较，#p<0.05，##p<0.01；与造模前比较△p<0.05，△△p<0.01。

图4所示结果：与假手术组对比，模型组大鼠在造模后1d，3d，7d，抓力明显降低(P<0.01)，实验组给药7d后可以明显增加抓力(P<0.05)。

机制研究动物实验：

一、材料与方法

1.动物：清洁级雄性SD大鼠(260-280g)所有大鼠均分笼适应性喂养一周，室温24℃～26℃，昼夜各12h，自由饮水进食。

2.分组：将30只雄性SD大鼠(260-280g)随机分为假手术组、MCAO模型组、实验组(即本申请实施例5制备得到的颗粒制剂)，每组各10只。

3.MCAO模型的建立：参照改良线栓法制备大脑中动脉阻塞大鼠模型。假手术组除不插硅胶线外，其它操作与模型组相同；清醒活动30min后行神经功能评分。

神经功能缺损评分参照Longa及Bederson评分标准。0分：正常；1分：自发行走时偏向左而不能走直线，轻度局灶神经功能丧失；2分：自发行走时向左侧轻度打转，中度局灶神经功能丧失；3分：自发行走时向左侧明显打转，重度局灶神经功能丧失；4分：爬行时向左侧倾倒或不能自发行走，有意识丧失。1-3分为建模成功，0分、4分淘汰。

4.干预方法：MCAO模型组、实验组均建立MCAO模型，造模前3天给药。假手术组和模型组每天给予双蒸水0.5ml/100g灌胃，实验组每天给予颗粒剂0.1ml/10g(2g生药/ml)灌胃，给药后24h取材。

5.指标检测

(1)透射电镜观察脑皮层神经元、线粒体超微结构

每组随机选取3只大鼠，麻醉后4％多聚甲醛溶液心脏灌注，切取缺血侧额顶部皮层脑组织约3mm

(2)免疫荧光检测IL-18和IL-1β表达

脑组织石蜡包埋，切片，PBS洗3次，4％的甲醛室温固定，PBS洗3次， 0.2％TritonX-100透化，PBS洗3次，5％BSA室温封闭，加一抗(用1％BSA 稀释)放在湿盒里，4度过夜；PBS洗3次，加二抗(用1％BSA稀释)，闭光，PBS洗3次，甘油封片，拍照保存。

二、结果

1.上述实施例5制备得到的颗粒制剂可减轻神经元损伤，保护线粒体结构

如图5所示，为各组透射电镜观察神经元及线粒体结构示意图。图中A1、 A2：假手术组，B1、B2：模型组，C1、C2：实验组。A1、B1和C1指示神经元的变化状态；A2、B2和C2指示线粒体的变化状态。

如图5整体附图所示结果：透射电镜观察缺血半暗带，与假手术组(A1、 A2)相比模型组(B1、B2)缺血半暗带神经元严重损伤，染色质密度增高，凝聚于核膜周围，内质网扩张，成空泡变性，线粒体嵴肿胀断裂，呈空泡状。实验组(C1、C2)干预后神经元损伤减轻，染色质均匀分布，内质网稍有扩张，线粒体可见嵴肿胀，未见空泡。

2.IL-18和IL-1β表达

如图6所示，为各组IL-18和IL-1β蛋白表达示意图。图8中，注：n＝10。 Sham：假手术组；model：MCAO模型组；YQHY：实验组。与假手术组比较， *p<0.05，**p<0.01；与模型组比较，#p<0.05，##p<0.01。

图6所示结果：Westernblot结果显示，与假手术组比较，模型组IL-18和 IL-1β表达明显增高(P<0.01)，实验组可抑制IL-18和IL-1β表达(P<0.01)。

本发明不局限于上述可选的实施方式，任何人在本发明的启示下都可得出其他各种形式的产品，均属于本发明的保护范围。上述具体实施方式不应理解成对本发明的保护范围的限制，本领域的普通技术人员应当理解，在不背离本发明的范围下，可对前述各实施例所记载的技术方案进行修改，或对其中部分或者全部技术特征进行等同替换，与此同时这些修改或者替换，并不会使相应的技术方案的本质脱离本发明各实施例技术方案的范围。