一种高效表达活性Dog Growth Hormone(GH)生长激素的方法

摘要

本发明公开了一种高效表达活性Dog Growth Hormone(GH)生长激素的方法，涉及基因重组技术领域，由以下步骤组成：步骤一、目的基因的合成，步骤二、目的基因测序，步骤三、Growth Hormone(GH)基因和表达载体的连接，步骤四、重组质粒PTZY1‑GH的转化，步骤五、重组质粒的酶切鉴定，步骤六、无内毒素质粒提取，步骤七、CHOS(仓鼠卵巢)细胞的转染，步骤八、目的蛋白的纯化，步骤九、验证所表达目的蛋白是否具有二硫键，并验证细胞的增殖活性。本发明通过表达的蛋白质量稳定，产量高，可达1‑2g/L，产品均一，细胞培养采用国产化培养基，相较于进口培养基可大幅节约原料成本，易于大规模生产，同时重组Dog Gh重组蛋白具有Nb2‑11细胞增殖活性，可用作狗生长激素药物的后续开发。