一种脱水四环素诱导的大肠杆菌-枯草芽孢杆菌通用型诱导表达系统

摘要

本发明公开了一种脱水四环素诱导的大肠杆菌‑枯草芽孢杆菌通用型诱导表达系统，属于基因工程领域。本发明构建了在大肠杆菌与枯草芽孢杆菌中均可使用脱水四环素诱导表达的操纵子Ptet表达系统，该系统以商业化质粒pHT01为表达载体，包括阻遏蛋白tetR表达框和超级折叠绿色荧光蛋白(sfGFP)表达框。其中对阻遏蛋白tetR表达框中的阻遏蛋白tetR的基因序列和RBS序列进行突变以改变阻遏蛋白亲和力和表达强度。操纵子Ptet表达系统在大肠杆菌和枯草芽孢杆菌中均表现出低泄漏和高的诱导放大倍数。因此本通用表达系统结构简单、活性高、调控严谨，在异源蛋白高效表达和合成生物学研究中有广阔的应用前景。