C57BL/6J小鼠来源CD19嵌合抗原受体T细胞的构建方法及应用

摘要

本发明公开了C57BL/6J小鼠来源CD19嵌合抗原受体T细胞的构建方法及应用，所述方法以C57BL/6J为研究背景，探索IL‑2是否存在下，不同刺激条件下CD3+T细胞最佳刺激活化和培养时间；并利用Plated anti‑CD3/CD28、Plated anti‑CD3+Soluble anti‑CD28和Plated anti‑CD3，3种不同刺激剂分别刺激活化T细胞，刺激结束后继续培养；然后运用逆转录病毒感染，制备mCD19CAR‑T细胞。与现有技术相比，本发明具有以下优点：(1)本发明所述方法能够更好的刺激活化T细胞，从而构建获得GFP+CAR‑T细胞百分率达到22.4％，制备的CAR‑T细胞可满足后续实验；(2)所述方法构建的mCD19CAR‑T细胞后续具有较好的细胞增殖能力，保证了其细胞疗效。