一种注射用七叶皂苷钠冻干乳剂的制备方法

摘要

本发明公开了一种注射用七叶皂苷钠冻干乳剂的制备方法，将七叶皂苷钠溶于非极性有机溶剂，然后与卵磷脂、油酸一起加入到注射用油中，搅拌均匀，然后除去非极性有机溶剂，得油相；将甘油、EDTA-2Na溶于注射用水中，得水相；将油相加至水相中，剪切，得初乳；调节初乳pH至5-7，均质，得乳剂；取冻干保护剂加入到均质好的乳剂中，搅拌，直至冻干保护剂完全溶解，然后经微孔滤膜过滤，分装、冻干，即得。本发明制备的冻干乳剂性质稳定，产品复溶性好，复溶后能形成粒径均匀、稳定的乳液，没有发生破乳现象，制剂中七叶皂苷钠A、B组分的含量稳定。

说明书

技术领域

本发明属于药物制剂领域，具体涉及一种注射用七叶皂苷钠冻干乳剂的制备方法。

背景技术

七叶皂苷又称七叶皂苷酸，是从七叶树科七叶树属植物种子提取得到的总皂苷、β -七叶皂苷或异七叶皂苷等的总称，属于三萜皂苷类。七叶皂苷的水溶解度较差，为增 加其溶解度，常将其制成钠盐。七叶皂苷主要含有4种成分，我国国家标准按液相色谱 出峰前后，依次命名为七叶皂苷A、七叶皂苷B、七叶皂苷C和七叶皂苷D。

七叶皂苷钠具有抗炎、抗水肿等多种功效，可用于脑水肿、创伤等疾病的治疗。由 于七叶皂苷钠主要的不良反应为血管刺激性，静脉炎，泌尿道系统的刺激性，目前的采 用七叶皂苷钠静脉注射剂临床应用受到了巨大的影响。CN101084911A公开了一种七叶 皂苷钠冻干乳剂的制备方法，其配方为七叶皂苷钠、凝脂、乳化剂、水溶性辅料和冻干 稳定剂，制备方法是先将七叶皂苷钠制成内水相，加入含有磷脂、乳化剂的油相中制备 初乳，再加入外水相制成w/o/w的乳液，最后冻干，其作用是七叶皂苷钠受水溶性辅料 中稳定剂和凝脂的保护，注射入血管后，不直接与血管壁接触，大大减少了刺激作用， 增加了临床的耐受性。

但是，由于七叶皂苷不稳定，导致现有的注射用七叶皂苷钠冻干乳剂稳定性较差， 尤其是七叶皂苷钠A、B组分的含量偏低，从而影响了疗效。

发明内容

本发明的目的是提供一种稳定性好，七叶皂苷钠A、B组分含量高的注射用七叶皂 苷钠冻干乳剂的制备方法。

为实现上述目的，本发明采用了以下技术方案：

一种注射用七叶皂苷钠冻干乳剂的制备方法：将0.1-5g七叶皂苷钠溶于10-50ml非 极性有机溶剂，然后与2-10g卵磷脂、0.05-0.35g油酸一起加入到50-200ml注射用油中， 搅拌均匀，然后旋转蒸发除去非极性有机溶剂，得油相；将5-20g甘油、0.01-0.05g  EDTA-2Na溶于200-600ml注射用水中，得水相；将油相加至水相中，并在40-80℃、 转速为3000-12000rpm条件下剪切10-60min，得初乳；调节初乳pH至5-7，并在 600-1200bar压力下均质5-10次，得乳剂；取25-150g冻干保护剂加入到均质好的乳剂 中，搅拌，直至冻干保护剂完全溶解，然后经0.1-0.5μm滤膜过滤，分装、冻干，即得。

优选地，所述的非极性有机溶剂为四氢呋喃或丙酮。

优选地，所述注射用油为大豆油或橄榄油或茶油。

优选地，所述冻干保护剂为乳糖、海藻糖、羟丙基-β-环糊精、磺丁基醚-β-环糊 精的一种或多种组合。

进一步优选地，所述冻干保护剂为乳糖、海藻糖和磺丁基醚-β-环糊精三种的组合， 所述乳糖、海藻糖和磺丁基醚-β-环糊精分别占冻干保护剂的重量百分比依次为 20-50％、30-60％、10-30％。

优选地，所述冻干包括以下步骤：

1)预冻：将过滤后的溶液置于-25℃保温3小时；

2)一次升华：在真空度低于20Pa，温度为-16℃条件下升华8小时；

3)再干燥：在真空度低于20Pa，温度为55℃再干燥10小时。

本发明的有益效果是：

1)本发明制备的冻干乳剂性质稳定，产品复溶性好，复溶后能形成粒径均匀、稳 定的乳液，没有破乳现象发生，制剂中七叶皂苷钠A、B组分的含量高。

2)本发明制备的冻干乳剂在水中复溶后形成o/w型乳液，注射入血管后，七叶皂 苷钠不直接与血管壁接触，大大减少了刺激作用，增加了临床的耐受性。

3)生产周期短，成本低。

具体实施方式

以下结合具体实施例对本发明进行详细地说明。

实施例1

一种注射用七叶皂苷钠冻干乳剂的制备方法：将2g七叶皂苷钠溶于20ml丙酮，然 后与6g卵磷脂、0.15g油酸一起加入到100ml注射用大豆油中，搅拌均匀，然后旋转蒸 发除去丙酮，得油相；将12g甘油、0.025g EDTA-2Na溶于400ml注射用水中，得水相； 将油相加至水相中，并在70℃、转速为8000rpm条件下剪切30min，得初乳；调节初乳 pH至5，并在800bar压力下均质8次，得乳剂；取80g冻干保护剂(乳糖24g、海藻糖 40g、磺丁基醚-β-环糊精16g)加入到均质好的乳剂中，搅拌，直至冻干保护剂完全溶 解，然后经0.22μm滤膜过滤，分装、冻干，即得。

所述冷冻干燥包括以下步骤：

1)预冻：将过滤后的溶液置于-25℃保温3小时；

2)一次升华：在真空度低于20Pa，温度为-16℃条件下升华8小时；

3)再干燥：在真空度低于20Pa，温度为55℃再干燥10小时。

实施例2

一种注射用七叶皂苷钠冻干乳剂的制备方法：将0.1g七叶皂苷钠溶于10ml四氢呋 喃，然后与2g卵磷脂、0.05g油酸一起加入到50ml橄榄油中，搅拌均匀，然后旋转蒸 发除去四氢呋喃，得油相；将5g甘油、0.01g EDTA-2Na溶于200ml注射用水中，得水 相；将油相加至水相中，并在80℃、转速为3000rpm条件下剪切60min，得初乳；调节 初乳pH至6，并在600bar压力下均质10次，得乳剂；取25g冻干保护剂(乳糖12.5g、 海藻糖7.5g、磺丁基醚-β-环糊精5g)加入到均质好的乳剂中，搅拌，直至冻干保护剂 完全溶解，然后经0.1μm滤膜过滤，分装、冻干，即得。

实施例3

将5g七叶皂苷钠溶于50ml丙酮，然后与10g卵磷脂、0.35g油酸一起加入到200ml 注射用油中，搅拌均匀，然后旋转蒸发除去丙酮，得油相；将20g甘油、0.05g EDTA-2Na 溶于600ml注射用水中，得水相；将油相加至水相中，并在40℃、转速为12000rpm条 件下剪切10min，得初乳；调节初乳pH至7，并在1200bar压力下均质5次，得乳剂； 取150g冻干保护剂(乳糖30g、海藻糖75g、磺丁基醚-β-环糊精45g)加入到均质好 的乳剂中，搅拌，直至冻干保护剂完全溶解，然后经0.5μm滤膜过滤，分装、冻干。

试验例1 pH值对初乳稳定性的影响

按实施例1的方法制备1000ml七叶皂苷钠初乳，将初乳分成5份，分别调节pH 值为5.0、5.5、6.0、6.5、7.0，并将上述不同pH值的七叶皂苷钠初乳样品置于70℃水 浴中，于2、4、8小时取样测定七叶皂苷钠A、B的含量，并计算出占投料量的百分比。 结果如下：

表1 pH值对七叶皂苷钠含量的影响

试验结果：调节初乳pH值为5.01和5.54时，样品70℃水浴下2、4、8小时后， 七叶皂苷钠A、B组分的含量变化较其它几个pH值小，因此将制备的初乳调节pH值 为5.0至5.5，有利于提高初乳的稳定性。

试验例2高压均质和灭菌工艺对乳剂中七叶皂苷钠A、B含量的影响

按照实施例1的方法制备一批七叶皂苷钠初乳，调节初乳pH至5.5，高压均质8 次后，按照常规的高温灭菌，测高压均质后和灭菌后的七叶皂苷钠A、B组分的含量， 同时以未调节pH的初乳为对照，考察高压均质和灭菌工艺对乳剂中七叶皂苷钠A、B 含量的影响，结果见表2。

表2高压均质和灭菌工艺对七叶皂苷钠含量的影响

试验结果表明：未调pH的初乳在均质和灭菌后A、B组分的含量下降幅度较大， 而调pH的初乳仅在灭菌后的含量有所下降。说明将初乳的pH值调节为5.0至5.5，有 利于提高后续工艺的稳定性，同时也说明本品不适合采用高温灭菌。

试验例3冻干保护剂对制剂稳定性的影响

按实施例1的方法进行制备，加入不同的常用冻干保护剂，用量均为80g，检测冻 干前和复溶后的平均粒径和七叶皂苷钠A、B组分的含量，结果见表3。

表3冻干保护剂对制剂稳定性的影响

以上结果可以看出，采用不同的冻干保护剂制备的冻干乳剂在冻干前后的粒径范围 和分布没有明显改变，冻干品的外观形状、复溶情况也都比较理想，七叶皂苷钠A、B 组分的含量也比较稳定，其中乳糖、海藻糖和磺丁基醚-β-环糊精的复合冻干保护剂的 含量最稳定。

试验例4冷冻干燥工艺参数对制剂稳定性的影响

按实施例1的方法制备乳剂，加入乳糖、海藻糖和磺丁基醚-β-环糊精的复合冻干 保护剂，微孔滤膜过滤除菌后采用不同的冻干工艺参数进行干燥，检测冻干后七叶皂苷 钠A、B组分的含量，工艺参数见表4，检测结果见表5。

表4冻干工艺参数

表5不同冷冻干燥工艺参数对制剂稳定性的影响

  溶解性 组分A含量 组分B含量 工艺1 在水中溶解较慢 27.62 19.58 工艺2 在水中溶解较慢 27.89 19.46 工艺3 在水中溶解快 28.17 19.63 工艺4 在水中溶解快 28.74 19.89 工艺5 在水中溶解快 28.32 19.71

从以上结果可以看出，冷冻干燥的工艺参数对制剂的性状和含量有一定影响，工艺 4和5的组分含量最高，而且整个工艺所用时间相对更短，综合评价后，采用在-25℃预 冻3小时，-16℃升华8小时，55℃干燥10小时的冻干工艺。