ХАРАКТЕРИСТИКИ ЯДЕРНЫХ ПРОТЕИНОВ ИЗ КЛЕТОК ГОЛОВНОГО МОЗГА И СЕЛЕЗЕНКИ КРЫС, РЕГУЛИРУЮЩИХ ЭКСПРЕССИЮ ГЕНА ИНТЕРЛЕЙКИНА-2

摘要

Уточнены молекулярные массы активных фракций белков, выделенных из ядер клеток селезенки (ЯБС) и ядер различных клеток (астроцитов, нейронов, глиальных клеток) головного мозга (ЯБМ) иммунизированных крыс, стимулирующих экспрессию гена интерлейкин.а-2 (ИЛ-2), частично описанных авторами ранее. Показано наличие общих фракций белков с Мг 13.5, 17.5, 18 и 19 кДа в составе ЯБС и ЯБМ. Электрофоретические спектры белков, выделенных из ядер различных клеток головного мозга, качественно одинаковы, не отличаются от спектра полипептидов тотальных ЯБМ и более гетерогенны, чем спектры ЯБС. Помимо белков с Мг 13.5-19 кДа в них доминируют протеины с Мг 36,48 и 75 к Да. ЯБМ с Мг 13.5-19, 36 и 75 кДа и ЯБС с Мг 13.5-19 кДа образуют стабил ьпые комплексы как с проксимальным (от +39 до -151 н.н.), так и с дистальным фрагментом (от -152 до -548 н.н.) регуляториой ДНК гена ИЛ-2; ЯБМ с Мг48 кДа взаимодействуют специфически только с проксимальным фрагментом промотора гена ИЛ-2. Полипеитиды с Мг 13.5-19 кДа и ЯБМ с Мг 48 кДа взаимодействуют с регуляторной ДНК гена ИЛ-2 посредством гидрофобных контактов; для ЯБМ с Мг 36 и 75 кДа эти взаимодействия электростатические. Вестерн-блоттинг ЯБС и ЯЬМ с по-ликлональными антителами к с-щп и с-1'оя компонентам трансфактора АР-1 показал, что ЯБС и ЯБМ с Мг 17.5, 18 и 19 кДа, а также ЯБМ с Мг 36 и 75 кДа обладают антигенными детерминантами, сходными с таковыми с-]ип. ЯБМ с Мг 75 кДа имеют также антигенные детерминанты, подобные таковым с-Гск. Проведен дополнительный анализ Ы-концевых аминокислотных последовательностей полипептидов с Мг 13.5, 18 и 19 кДа и поиск гомологии в банке компьютерных данных. Представленные результаты подтверждают гипотезу о существовании в ядрах клеток селезенки и различных клеток головного мозга сходных белковых трансактиваторов гена ИЛ-2.