不同因素对油茶未授粉子房愈伤组织诱导的影响

摘要

【目的】为油茶的单倍体育种提供参考。【方法】以普通油茶‘华硕’为试材,对其未授粉子房进行离体培养,诱导愈伤组织,研究消毒处理对油茶子房褐化和染菌的影响,及激素的种类和浓度、子房切割方式、子房发育时期、子房预处理方式等因素对愈伤组织诱导的影响,并使用筛选出的2种激素和蔗糖进行L9(33)正交试验,将正交试验结果进行极差分析和方差分析,进一步筛选油茶子房愈伤组织诱导的最佳培养基。【结果】选择开花当天的油茶未授粉花蕾,热激(35℃)预处理1 d后,剥出子房部分,采用75%乙醇溶液浸泡60 s、0.1%升汞溶液浸泡5 min的方式进行消毒处理,纵切后,接种到MS+60 g/L蔗糖+7 g/L琼脂+0.3 mg/L NAA+2 mg/L TDZ培养基上,愈伤组织诱导率最高,为72.34%。诱导出的愈伤组织呈浅绿色,质地紧密。TDZ和NAA显著影响了油茶子房的愈伤组织诱导率,且TDZ的影响大于NAA,蔗糖对诱导率的影响不显著。【结论】在各影响因素中,对油茶未授粉子房愈伤组织诱导率影响最明显的是激素的种类和浓度,适宜激素为NAA和TDZ,适宜的质量浓度分别为0.3、2.0 mg/L。子房的发育时期、切割方式、预处理方式等均会影响其愈伤组织诱导率,选择开花当天的子房,热激(35℃)预处理1 d并纵切,可以提高愈伤组织的诱导率。