木尼孜其对加入顺铂培养的大鼠卵巢颗粒细胞性激素分泌及增殖调控作用观察

摘要

目的观察木尼孜其对加入顺铂培养的大鼠颗粒细胞性激素分泌及细胞增殖的调控作用。方法①木尼孜其血清制备:60只5~6周龄雌性SD大鼠随机分为木尼孜其高、中、低剂量组,每组20只,分别用木尼孜其合剂7.6、3.8、1.9毫升/只灌胃,早晚各1次,共灌胃7 d。第7天早上将2次剂量一次性灌胃,灌胃结束1~2 h采集三组大鼠腹主动脉血,分离高、中、低剂量木尼孜其血清。②大鼠卵巢颗粒细胞制备:3周龄雌性SD大鼠10只,皮下注射孕马血清促性腺激素50 IU/只。注射48 h时处死大鼠,分离卵巢组织,鉴定卵巢颗粒细胞。③大鼠卵巢颗粒细胞分组及木尼孜其血清给予方法:取大鼠卵巢颗粒细胞,分为3组,其中1、2组加入5μg/mL的CP培养48 h。培养后1组再分为三个亚组,分别加入高、中、低剂量木尼孜其血清培养。2组为顺铂组,3组为正常对照组,均用10%胎牛血清的培养基培养。④各组大鼠卵巢颗粒细胞培养液卵泡刺激素(Follicle-stimulating hormone,FSH)、黄体生成素(Lutein⁃izing hormone,LH)、雌二醇(Estradiol 2,E2)检测:培养48 h时取各组细胞培养液,ELISA法检测细胞培养液FSH、LH和E2。⑤各组大鼠颗粒细胞增殖情况观察:分别于培养24、48、72、96 h时取各组细胞,采用CCK-8法观察细胞增殖情况。结果与正常组比较,CP组大鼠卵巢颗粒细胞培养液FSH和LH水平升高、E2水平下降(P均<0.05);与CP组比较,高剂量组大鼠卵巢颗粒细胞培养液FSH和LH水平下降、E2水平升高(P均<0.05);与低、中剂量组比较,高剂量组大鼠卵巢颗粒细胞培养液FSH和LH水平下降、E2水平升高(P均<0.05)。与正常组比较,培养24、48、72、96 h时CP组卵巢颗粒细胞OD450值均降低(P均<0.05);与CP组比较,培养24、48、72、96 h时高剂量组卵巢颗粒细胞OD450值均升高(P均<0.05);与低、中剂量组比较,培养24、48、72、96 h时高剂量组卵巢颗粒细胞OD450值均升高(P均<0.05)。结论木尼孜其可抑制顺铂培养的大鼠颗粒细胞FSH、LH表达、促进E2表达。木尼孜其可促进顺铂培养大鼠卵巢颗粒细胞的增殖,并且浓度越高对细胞的促增殖效果越明显。7.6毫升/只灌胃剂量的木尼孜其对顺铂培养大鼠卵巢颗粒细胞性激素分泌及增殖调控作用最佳。