miR-452-5p对肝癌细胞迁移和侵袭能力的影响及作用靶点预测

摘要

目的观察miR-452-5p对肝癌细胞迁移、侵袭能力的影响,并预测其作用靶点。方法将肝癌SMMC7721细胞分为miR模拟组、对照1组、miR抑制组、对照2组;miR模拟组转染miR-452-5p mimic,对照1组转染miR-452-5p mimicNC,miR抑制组转染miR-452-5p inhibitor,对照2组转染miR-452-5p inhibitorNC;转染24 h后,采用细胞划痕实验和Transwell迁移实验检测肝癌细胞迁移能力,采用Transwell侵袭实验检测细胞侵袭能力。miRNA靶基因预测软件得出EPB41L33'UTR含有miR-452-5p的结合位点,利用双荧光素酶报告实验验证miR-452-5p与EPB41L33'UTR的结合;采用Westernblotting法检测miR模拟组、对照1组、miR抑制组、对照2组细胞中的EPB41L3蛋白。结果miR模拟组细胞迁移率及Transwell实验迁移细胞数、侵袭细胞数高于对照1组(P均<0.05)。miR抑制组细胞迁移率及Transwell实验迁移细胞数、侵袭细胞数低于对照2组(P均<0.05)。双荧光素酶报告实验结果提示miR-452-5p可以直接结合EPB41L33'UTR,即EPB41L3是miR-452-5p的直接靶基因。miR模拟组细胞中EPB41L3蛋白表达低于对照1组,miR抑制组细胞中EPB41L3蛋白表达高于对照2组(P均<0.01)。结论miR-452-5p高表达可提高肝癌细胞的迁移侵袭能力,作用机制可能与靶向调控EPB41L3有关。