羟基红花黄色素A腹腔注射对大鼠脑缺血再灌注损伤的预防作用及其机制

摘要

目的观察羟基红花黄色素A(HYSA)腹腔注射对大鼠脑缺血再灌注损伤的预防作用,并探讨其机制。方法60只SD大鼠随机分成假手术组、模型组、丁苯酞组、低剂量HYSA组、高剂量HYSA组,每组12只。假手术组、模型组腹腔注射0.9%NaCl溶液,丁苯酞组腹腔注射丁苯酞软胶囊混悬液,低剂量HYSA组腹腔注射5.0 mg/mL的HYSA,高剂量HYSA组腹腔注射10.0 mg/mL的HYSA,每天1次,连续5 d后,模型组、丁苯酞组、低剂量HYSA组、高剂量HYSA组使用小修正方法进行脑缺血再灌注处理,假手术组不处理。各组大鼠处理完毕后清醒4 h,采用Longa评分法对各组大鼠进行神经功能评分。处理完毕后,采用HE染色法观察大鼠脑组织形态学变化,采用RTqPCR法检测大鼠脑组织中Bax、Bcl-2、Caspase-3、c-fos mRNA,采用Western Blotting法检测大鼠脑组织中Bax、Bcl-2、Caspase-3、c-fos蛋白。结果模型组大鼠神经功能评分显著高于其余各组(P均<0.05),高剂量HYSA组、丁苯酞组大鼠神经功能评分显著低于低剂量HYSA组(P均<0.05)。模型组大鼠脑组织细胞间隙明显增大,细胞核减少且深染,细胞形态不规则;低剂量HYSA组较模型组细胞形态有一定改善,但部分细胞核仍浓缩深染;高剂量HYSA组和丁苯酞组细胞坏死明显改善,细胞形态恢复正常,细胞排列整齐。模型组大鼠脑组织中Bax、Caspase-3、c-fos mRNA和蛋白的相对表达量显著高于其余各组(P均<0.05),Bcl-2 mRNA和蛋白的相对表达量显著低于其余各组(P均<0.05);高剂量HYSA组、丁苯酞组大鼠脑组织中Bax、Caspase-3、c-fos mRNA和蛋白的相对表达量显著低于低剂量HYSA组(P均<0.05),Bcl-2 mRNA和蛋白的相对表达量显著高于低剂量HYSA组(P均<0.05)。结论高剂量(10.0 mg/mL)HYSA腹腔注射对大鼠脑缺血再灌注损伤有预防作用,与丁苯酞效果相当;HYSA预防大鼠脑缺血再灌注损伤的作用机制可能与调节脑组织中Bax、Bcl-2、Caspase-3、c-fos的表达有关。