LncRNA KCNQ1OT1在肝癌组织和肝癌细胞系中表达及对肝癌干细胞自我更新能力的调节作用观察

摘要

目的 观察长链非编码RNA KCNQ1OT1在肝癌组织和肝癌细胞系中表达及对肝癌干细胞自我更新能力的调节作用,并探讨其机制.方法 采用RT-PCR法检测肝癌组织与癌旁组织、肝癌细胞系(Huh7、SMMC7721、Hep3B)与人永生化正常肝上皮细胞LO2中KCNQ1OT1.使用肝癌细胞系Huh7筛选获得CD13+ CD133+的肝癌干细胞,分为A、B、C组,B组转染小干扰RNA技术抑制KCNQ1OT1表达的KCNQ1OT1敲降质粒KCNQ1OT1 shRNA,C组转染KCNQ1OT1 shRNA后转染YAP1过表达载体.采用细胞成球实验观察各组肝癌干细胞成球能力,采用克隆形成实验观察各组肝癌干细胞克隆形成能力,采用CCK8实验观察各组肝癌干细胞增殖能力.采用RT-PCR法检测各组肝癌干细胞中Hippo-YAP通路靶基因Yap1、Birc5、Foxm1 mRNA.结果 肝癌组织中KCNQ1OT1的相对表达量高于癌旁组织(P＜0.05),Huh7、SMMC7721、Hep3B细胞中KCNQ 1OT1的相对表达量高于L02细胞(P均＜0.05).B组肝癌干细胞成球率、克隆形成数、24、48、72、96 h时的OD值均低于A、C组(P均＜0.05).B组肝癌干细胞中Yap1、Birc5、Foxm1 mRNA相对表达量均低于A、C组(P均＜0.05).结论 KCNQ1OT1在肝癌组织和肝癌细胞系中高表达;抑制KCNQ1OT1表达可以降低肝癌干细胞的自我更新能力,高表达YAP1可拮抗此过程;KC-NQ1OT1可能是通过激活Hippo-YAP信号通路影响肝癌干细胞的自我更新能力.