山奈素对乳腺癌细胞增殖、凋亡的影响及其机制

摘要

cqvip:目的 探讨山奈素对乳腺癌细胞增殖和凋亡的影响及其可能的作用机制。方法 将不同浓度(25、50、75和100μg/mL)的山奈素作用乳腺癌MCF7细胞12、24、48、72 h,MTT法检测细胞增殖抑制率,筛选山奈素的最佳作用浓度为75μg/mL、作用时间为48 h。将乳腺癌MCF7细胞分为山奈素组、索拉菲尼(sorafenib)组、ML-099+山奈素组、空白对照组,分别加入含75μg/mL山奈素的培养基、含10μmol/L有丝分裂原活化蛋白激酶(Ras/Raf/MEK/ERK)信号通路抑制剂sorafenib的培养基、含5μmol/L Ras/Raf/MEK/ERK信号通路激活剂ML-099与75μg/mL山奈素的培养基、等量PRMI1640培养基。培养48 h,采用MTT法检测细胞增殖抑制率,流式细胞术检测细胞凋亡率,实时荧光定量PCR法检测丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶1(Raf-1)、细胞外信号调节激酶(ERK)、细胞周期蛋白D1(Cyclin D1)、半胱氨酸蛋白酶3(Caspase-3)mRNA表达,Western blotting法检测p-Raf-1、p-ERK、Cyclin D1、Caspase-3蛋白表达。结果 山奈素组和sorafenib组细胞增殖抑制率、细胞凋亡率、Caspase-3 mRNA相对表达量均高于ML-099+山奈素组和空白对照组,Raf-1、ERK、Cyclin D1 mRNA相对表达量均低于ML-099+山奈素组和空白对照组(P均0.05。结论 山奈素可抑制乳腺癌细胞增殖并促进其凋亡,其机制可能与抑制Ras/Raf/MEK/ERK信号通路有关。