胆固醇结石病小鼠胆囊组织中Rho-ROCK信号、钙调信号相关分子的表达及意义

摘要

cqvip:目的观察胆固醇结石病(胆石病)小鼠胆囊组织中Rho-ROCK信号和钙调信号相关分子的表达,探讨其在胆固醇结石形成过程中的作用。方法将40只C57BL/6小鼠随机分为对照组和胆石组各20只,对照组给予正常饮食,胆石组给予高脂饮食诱导胆石病模型,连续8周。小鼠麻醉,剖腹观察胆囊的结石形成情况。胆总管插管,收集胆汁,采用荧光探针检测胆汁中的钙离子(Ca^2+)水平;眼球取血,采用HITACHI自动分析仪检测胆汁和血清总胆固醇和高密度胆固醇(HDL-C)含量,并计算非高密度脂蛋白胆固醇含量。小鼠脱颈椎处死,取胆囊组织,采用HE染色法观察胆囊组织的病理变化;采用RT-PCR法和Western blotting法检测胆囊组织中Rho-ROCK信号相关分子(RhoA、RhoB、ROCK)和钙调信号相关分子[肌球蛋白轻链激酶(MLCK)、磷酸化的肌球蛋白轻链(p-MLC)、肌球蛋白轻链磷酸酶(MLCP)]mRNA及蛋白表达。结果对照组胆囊无结石和胆泥形成,胆石组胆囊出现胆结石6只、胆泥5只,其余9只未造模成功被排除。与对照组相比,胆石组胆汁分泌率和胆汁中的Ca 2+水平下降,胆汁和血清总胆固醇、非高密度脂蛋白胆固醇升高(P均<0.05)。病理检查显示,胆石组胆囊组织出现炎症细胞浸润及胆囊壁增厚等炎症迹象。胆石组胆囊组织中RhoA、RhoB、ROCK、MLCK、p-MLC mRNA及蛋白表达较对照组下降,MLCP mRNA及蛋白表达较对照组升高(P均<0.05)。结论胆石病小鼠胆囊组织中Rho-ROCK信号和钙调信号相关分子的表达发生异常变化,Rho-ROCK和钙调信号相关分子可能参与了胆固醇结石的形成过程。