耐碳青霉烯类抗生素大肠埃希菌的耐药基因检测及传播机制探讨

摘要

目的 检测耐碳青霉烯类抗生素大肠埃希菌的耐药基因,并探讨其传播机制.方法 临床分离的耐碳青霉烯类抗生素大肠埃希菌3株,分别编码为DC10、DC44、DC52.用PCR法扩增筛查DC10、DC44、DC52的耐药基因,对扩增产物测序确定基因型别;通过接合实验得到DC10、DC44、DC52与耐叠氮钠的大肠埃希菌J53的接合子,对接合子进行菌种鉴定、药敏试验、耐药基因检测及测序;采用多位点序列分析(MLST)确定DC10、DC44、DC52的基因序列型(ST型),并利用eBURST软件进行亲缘性分析.结果 DC10、DC44、DC52中blaNDM基因均阳性,其它碳青霉烯类耐药基因、喹诺酮类耐药基因均阴性.经测序确认DC10、DC52均携带blaNDM-1基因,其中DC52同时携带blaTEM-1基因;DC44携带blaNDM-3基因,同时携带blaTEM-1基因和blaCTX-M-15基因.DC10、DC44、DC52均与J53接合成功,接合子为大肠埃希菌.接合子除对替加环素、阿米卡星敏感外,对β-内酰胺酶类和碳青霉烯类抗生素均耐药,接合子均含有与DC10、DC44、DC52相同的碳青霉烯酶基因.DC10的MLST分型为ST744、DC44为ST7219、DC52为ST167.ST744和ST167同属于CC10克隆群,ST7219属于CC131克隆群.结论 耐碳青霉烯类抗生素大肠埃希菌的耐药基因为blaNDM基因,耐药基因blaNDM均能通过质粒水平传播.