皮肤鳞状细胞癌细胞中BAG-1表达变化对细胞增殖、凋亡的影响及机制

摘要

目的 观察Bcl-2结合抗凋亡基因1(BAG-1)在皮肤鳞状细胞癌(CSCC)细胞株A431中的表达水平,并探讨其对A431细胞增殖和凋亡的影响及其作用机制.方法 分别采用qRT-PCR及Western blotting法检测CSCC细胞株A431和人正常永生化上皮细胞Hecate中BAG-1 mRNA、蛋白表达.常规培养CSCC细胞株A431,感染BAG-1敲减病毒(抑制组,sh-BAG-1),并设立阴性对照(对照组),培养48 h后,分别采用qRT-PCR及Western blot-ting法检测BAG-1 mRNA及蛋白的表达,采用MTS法检测细胞增殖活力、平板克隆试验检测细胞克隆形成能力、流式细胞术检测细胞周期和细胞凋亡率、Western blotting法检测Mdm-2、p53及其下游基因Bcl-2和p21蛋白的表达水平.结果 CSCC细胞系A431中BAG-1mRNA相对表达量高于人正常永生化上皮细胞Hecate(P<0.05).与对照组比较,抑制组BAG-1蛋白相对表达量下降,细胞增殖及克隆形成能力减弱,细胞阻滞在G1期,细胞凋亡增多,Mdm-2蛋白表达减少,p53、p21和Bcl-2蛋白表达均增多(P均<0.05).结论 CSCC细胞中BAG-1高表达,其可能通过调控Mdm-2/p53信号通路增强CSCC细胞增殖、抑制其凋亡.