下调miR-215-5p对TGF-β诱导的人肺成纤维细胞IMR-90增殖抑制作用观察

摘要

目的 探讨下调miR-215-5p对TGF-β诱导的人肺成纤维细胞IMR-90增殖的影响及其机制.方法 将体外培养的IMR-90细胞分为对照组、TGF-β组、TGF-β+ NC inhibitor组、TGF-β+ miR-215-5p inhibitor组.对照组细胞正常培养;TGF-β组给予10 ng/mL的TGF-β处理细胞;TGF-β+ NC inhibitor组和TGF-β+ miR-215-5p inhibitor组细胞先采用NC inhibitor或者miR-215-5p inhibitor转染细胞,24 h后加入10 ng/mL的TGF-β处理细胞.采用MTT法检测各组在转染后24、48、72、96 h的细胞增殖能力;流式细胞术检测转染48 h后细胞周期变化情况;荧光定量PCR和Western blotting法检测转染48 h后各组细胞cyclinD1、RB1和α-SMA的表达.结果 转染后48、72、96 h,TGF-β组细胞增殖能力高于对照组(P均＜0.05),TGF-β+ miR-215-5p inhibitor组细胞增殖能力低于TGF-β+NC inhibitor组(P均＜0.05).与对照组相比,TGF-β组G1期细胞比例降低,S期细胞比例升高(P均＜0.05);与TGF-β+ NC inhibitor组相比,TGF-β+ miR-215-5p inhibitor组G1期细胞比例增加,S期细胞比例降低(P均＜0.05).与对照组相比,TGF-β组cyclinD1、αα-SMA的表达升高,RB1的表达降低(P均＜0.05);与TGF-β+ NC inhibitor组相比,TGF-β+ miR-215-5p inhibitor组cyclinD1、αα-SMA的表达降低,RB1的表达升高(P均＜0.05).结论 下调miR-215-5p对TGF-β诱导的人肺成纤维细胞IMR-90增殖具有抑制作用.该作用可能原因为下调miR-215-5p能够抑制RB1表达进而下调cyclinD1,阻碍TGF-β诱导的肺成纤维细胞的周期转换进而抑制肺成纤维细胞的增殖;同时,下调miR-215-5p也能够抑制α-SMA的表达阻碍TGF-β诱导的肺成纤维细胞向肌成纤维细胞转化.