P53、C-erbB-2在人脑胶质瘤中的表达及意义

摘要

@@ 近年来的分子生物学研究表明,P53基因突变后表达的突变型P53蛋白可失去抑制细胞增殖、启动DNA修复及诱导细胞凋亡的作用,导致细胞增殖过度、凋亡减少及异常蓄积和转化.为了解P53蛋白与胶质瘤的生物学行为关系,以及其在胶质瘤发生、发展中同对立基因C-erbB-2可能的协同作用,我们采用免疫组织化学方法对人脑胶质瘤中P53和C-erbB-2的表达产物进行了检测.现将结果报告如下.rn1 资料与方法rn1.1 标本来源经脑外科手术切除的胶质瘤石蜡包埋组织块标本49例份.49例患者中,男28例,女21例;年龄15～81岁,平均48.5岁.标本经10%中性福尔马林固定,常规石蜡切片,切片厚5μm,HE染色.按WHO中枢神经系统肿瘤分类标准分型,49例均为星形胶质细胞瘤,其中Ⅰ级6例、Ⅱ级15例、Ⅲ级17例、Ⅳ级11例.rn1.2 主要试剂鼠抗人P53单克隆抗体(Clone 007),鼠抗人C-erbB-2单克隆抗体(Clone rn100),SABC试剂盒;以上试剂均为美国Zymed公司产品.rn1.3 免疫组化染色方法石蜡组织切片4μm厚,充分烤片,常规脱蜡,0.5%胰酶消化20分钟,5%正常羊血清封闭37℃共20分钟;分别滴加1∶50 P53和C-erbB-2单克隆抗体,4℃过夜;加入二抗1∶100,室温待30分钟;滴加1∶300生物素标记的羊抗兔IgG及过氧化物酶-链霉卵白素.DAB-H2O2显微镜控制下显色.苏木素复染细胞核.常规脱水后中性树胶封片.PBS代替P53、C-erbB-2做阴性对照,用已知P53、C-erbB-2阳性组织做阳性对照.