慢病毒介导大鼠肾脏基因转染的实验研究

摘要

目的研究活体大鼠肾脏中慢病毒载体介导的基因转染及表达情况.方法以水泡性口炎病毒包膜蛋白(VSV-G)为包膜、携带以磷酸甘油酸激酶(PGK)启动子启动的LacZ报告基因的慢病毒载体注射Lewis大鼠右侧肾脏实质,分别于注射后1、2、3、7天处死大鼠(每个时间点实验组n=3,对照组n=2),通过β-半乳糖苷酶(β-Gal)组织化学染色检测报告基因的表达.结果实验组大鼠右肾可见β-Gal染色阳性细胞,而对侧肾脏及其他脏器均未见β-Gal表达;β-Gal的表达在肾实质注射2天后达到峰值,到第7天仍能维持较高水平.β-Gal阳性细胞周围未见明显炎症细胞浸润.病毒载体注射的肾脏外观及组织形态学未见异常.结论慢病毒载体能有效而稳定的将外源基因导入活体大鼠肾脏而无明显毒副作用.